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标题:【讨论帖】看图说细胞-状态好坏鉴别

11_hjx[使用道具]
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说道细胞培养污染的问题,其实每个环节都有可能增加污染的可能性和影响细胞培养效果。就离心而言,我一般都是500rpm离心3分钟,而后在超净台用酒精棉球擦拭玻璃离心管表面,在有就是毛吸管尽量使用一次操作,避免连环污染
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dog002[使用道具]
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前辈您好,我现在培养raji细胞,但是很没有经验。传代是怎样传合适?因为我养的细胞虽然也成团,但是飘散的特别多,很多都沉到底,单个,也不聚集成团。细胞是师兄给的,他说传代时就是吸走三分之二,再加入新的培养基就行了。但是我按这种方法养的就不是很好。还有弃掉三分之二,那岂不就是把成团的弃掉,留下的不都是沉到底的单个细胞吗?还有人说先把细胞吹散再传,还有说是离心的,究竟该怎么办啊,请前辈指点。我现在都不敢传了,觉得本来好好的细胞液被我传坏了
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楼主养过A431细胞吗,我们的细胞状态我有点无法分辨
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mimili_901[使用道具]
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骨髓单核细胞用feicoll淋巴细胞分离液提取行吗
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楼主的耐心真是厉害,看来是妹妹无疑了。如果淋巴细胞分不出来,到底是怎么回事呢?明明出现了pbmc层, ...

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可能是分离液的问题,你把分离液一起吸出离心,里面应该会有很多细胞的。
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DCS[使用道具]
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我正在培养两种人B淋巴细胞,L721.221, Raji。对细胞状态好坏的鉴别有一点心得,希望和大家讨论。
长的好的细胞有下面几点特征:
1. 培养液:澄清,能很快变黄(5%CO2培养箱,12h之内),说明增殖快
2. 低倍镜(10X10): 细胞透亮,“晶晶亮”,大小均一,其中还有个别“超级大个子”,是处于分裂前期的细胞,胞膜完整,不是细胞肿胀。
3. 低倍镜(10X10): 聚集悬浮生长的细胞,通常能看到一簇一簇的细胞群,应该就是一个个“克隆”吧。
4. 低倍镜(10X10): 细胞容易悬浮,容易随培养液“四处飘荡”,即使形成较大的细胞簇,也是“飘飘荡荡”的。
5. 高倍镜(10X40): 大小钧一,形态规则,胞膜完整。
长得不好的细胞正好与前面相反:
1. 培养液: 有浑浊感,不变黄(几天甚至几星期都是红的),细胞根本不在呼吸代谢。
2. 低倍镜(10X10): 细胞黯淡无光,几乎看不到“大个头”的细胞。
3. 低倍镜(10X10): 很少有小簇细胞群,(若是细胞密度过大造成细胞状态不好,只有很大的细胞群,没有新生的细胞“小”克隆)。
4. 低倍镜(10X10): 细胞不容易“飘荡”,似乎很“重”,粘在瓶底,还可以在瓶底看到细胞的残骸(淡淡的细胞样的痕迹)。
5. 高倍镜(10X40): 大大小小,深深浅浅,没有固定的外形,(能看到各种怪样子),是细胞凋亡皱缩,或崩解造成的。
......

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您的细胞养的真好。。。请问下,96孔和48孔的细胞数和培养基该是多少合适?谢谢
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