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标题:【求助】胰酶中EDTA的作用

sistis[使用道具]
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发表于 2015-8-11 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】胰酶中EDTA的作用


含EDTA的胰酶和不含EDTA的胰酶有何区别？什么情况下不能用含它的胰酶？
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dog002[使用道具]
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发表于 2015-8-11 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA是钙离子的鳌合剂，在胰酶中加入EDTA的作用简单的说就是为了增加胰酶的消化作用，尤其适用于比较难于消化的细胞；同时可以减少胰消化时间，以减少酶对细胞的损伤作用。
在加入EDTA的消化酶作用后，必须离心才能去除EDTA。
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发表于 2015-8-11 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA作为一种螯合剂，可以加强胰酶的消化能力，根据细胞的不同选择不同的胰酶
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发表于 2015-8-11 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA溶液也常用来解离细胞，它的作用机制是破坏细胞间的连接。对于一些贴壁特别牢固的细胞，还可以用EDTA和胰酶的混合液进行消化。EDTA溶液的使用浓度为0.02%，配制时应加碱助溶，配制后可过滤除菌，也可高温消毒灭菌。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2015-8-11 15:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用Annexin V做细胞凋亡检测时，不能用含EDTA的胰酶，否则EDTA会螯合Ca2＋，从而影响Annexin V与PS的结合。
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发表于 2015-8-11 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA溶液也常用来解离细胞，它的作用机制是破坏细胞间的连接。对于一些贴壁特别牢固的细胞，还可以用EDTA和胰酶的混合液进行消化。EDTA溶液的使用浓度为0.02%，配制时应加碱助溶，配制后可过滤除菌，也可高温消毒灭菌。

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EDTA溶液的使用浓度为0.02%，配制时应加碱助溶，具体能指导下吗？加什么碱，加多少？
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发表于 2015-8-11 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 dog002 于 2015-8-11 15:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

EDTA是钙离子的鳌合剂，在胰酶中加入EDTA的作用简单的说就是为了增加胰酶的消化作用，尤其适用于比较难于消化的细胞；同时可以减少胰消化时间，以减少酶对细胞的损伤作用。
在加入EDTA的消化酶作用后，必须离心才能去除EDTA。 ...

如果比较难消化的细胞，还可以在EDTA的基础上加利多卡因，阻断细胞膜钙离子通道，强化EDTA的作用
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发表于 2015-8-11 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA的作用如是，可以根据他的作用机理来看情况：EDTA是一种螯合剂，它可以螯合Ca2 或Mg2 ,而细胞表面很多和培养皿或培养瓶结合的蛋白都是带有Ca2 或Mg2 的，把这些离子螯合后，可以加速细胞和培养皿的脱离，促进消化.EDTA是2价阳离子螯合剂，所以能螯合钙、镁等离子。上皮类细胞的连接存在“桥粒”结构，是细胞间最“牢固”的连接，但桥粒的形成依赖于钙离子的存在。在胰酶消化细胞时，加入EDTA，可以破坏细胞的桥粒结构，使细胞能够分散成单个细胞。通俗地说，就是破坏细胞间的粘连。
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-8-11 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看来有EDTA的胰酶必须离心后再培养，否则不利于细胞贴壁
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2015-8-11 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加了EDTA的胰酶消化后必须离心才能继续培养吗？
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