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标题:【分享】MTT大全

toy[使用道具]
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我也来说两句:MTT法在用于测定药物的细胞增殖抑制作用上还是有些缺点的,我师兄的一篇文章投到 kidney international (影响因子5.0——6.0吧),结果被退了回来,主要是因为这个问题:
“【Table 2 : the MTT test does not assess proliferation, but only reflects the number of viable cells. The OD at 48 and 72hrs arereduced when compared to .........the authors should perform an additional assay for proliferation assessment ( ex : BrdU or thymidine incorporation ) .The MTT data should be shown as bar graphs, and include a time zero lane (to show if the absolute number of cells has indeed increased at 24hrs or not)】”
以上是退槁原文。师兄先正在做BrdU呢。
所以,我觉得:
正如许多大虾所言,MTT在国外的许多大的药物研发机构中,仍被用于大量药物的粗筛,因为MTT法有太多的优点了:简便、快速、重复性好、价格低、所需细胞少、无放射性等等,在国内更是被大量应用于抗肿瘤药物的筛选极其他方面,MTT的确是个好东东。但是如果想让文章发的更好一点,建议别怕多花钱,用BrdU吧!!!
如果哪位大虾能更详细地介绍一下MTT、BrdU、以及放射性同位素掺入试验等方法的优劣极其原因,那就更好了,谢谢。
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youyou99[使用道具]
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统计学假设检验的 方法 需要再补充。例如 :不同的试验设计,可以有不同的假设检验方法t检验,方差分析,X2检验。
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youyou99[使用道具]
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有一个问题需要向大家请教:
IC50与时间有没有关系?如果我分别培养3天和4天,计算出来的结果有没有差别?我正在准备作这个实验,现在还处于纸上谈兵阶段,有许多问题都搞不清,希望大家不吝赐教。谢谢!
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DCS[使用道具]
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最近做了很多次MTT,发现这种方法不是很稳定,看趋势没问题,但要根据其得出结论,未免有些粗。
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蒲公英[使用道具]
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相关疾病:
46XX性发育睾丸疾病

CCK-8,CCK-F,都是日本产的cell counting kit。 不是MTT的改进品。前者的作用机制是细胞中的脱氢酶使该试剂产生一种有黄色物质(formazan),它在460nm有最大吸收。作用比MTT,WST-1都敏锐。
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feiya[使用道具]
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急请教:调零孔最终是只有DMSO吗?选用测定波长540nm可以吗?因为我科没有酶标仪,测定需要到别处,若加完后不能立即测定可以过夜吗?若可以又将如何保存该板呢?加入DMSO后震荡使其溶解,对震荡力度及时间有要求吗?剧烈机械震荡可以吗?例如放在漩涡混合器上。望请大家指点!不胜感谢!!!
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要是贴壁细胞,就可以不用离心。
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is2011[使用道具]
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请问,MTT加药的话,是用什么浓度比较合适,是否有动物体内用量转换成细胞实验浓度的公式?
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langlang[使用道具]
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那个,老师说MTT用490nm测,酸化异丙醇等用570nm测,我有异议。
DMSO溶解后,紫红色的液体吸光度扫描的峰值在550nm,用的是thermo的酶标仪本身的扫描功能,和所说的570nm是峰值不一致,不知为何原因。老师说用490nm测,那已经基本是到450nm的峰谷了。
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dog002[使用道具]
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我做的GMCSF测活,为什么每次镜下看细胞有很好趋势的,但是加进去MTT之后一点颜色变化都没有?MTT是新配的,浓度是5mg/ml的,各位有经验,能帮我分析到底是哪里出问题了嘛?
先谢了~
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