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标题:【求助】 细胞免疫荧光

zzzz[使用道具]
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我最近也在做细胞免疫荧光,麻烦问一下我的抗体说明书写了可以做免疫组化,western,流式,不知道这个抗体可不可以做细胞免疫荧光呢?还有就是我的抗原在细胞膜上表达,做的时候要不要通透处理呢?
还有:
我最近也做免疫荧光,用的是红色的染料CY3,发现一个问题,这个荧光2抗非特异性太强了,染出来的照片是很漂亮,但是一看只加CY3的二抗对照,也是有很强的染色,几乎没什么差别,这个问题怎么解决啊?通过降低稀释度或多次清洗能减弱或避免非特异性着色吗?
恳请相关人士帮我解答 非常感谢啊!!!
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happylife123[使用道具]
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免疫荧光具有:特异性强、敏感性高、速度快的特点,在临床上具有越来越重要的作用。全自动化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。其工作原理是:将定量的患者血清和辣根过氧化物(HRP)加入到固相包被有抗体的白色不透明微孔板中,血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的游离成分。然后,加入鲁米诺Luminol发光底液 ,利用化学反应释放的自由能激发中间体,从基态回到激发态,能量以光子的形式释放。此时,将微孔板置入分析仪内,通过仪器内部的三维传动系统,依次由光子计数器读出各孔的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学模型进行定量分析。最后,打印数据报告,以辅助临床诊断。
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