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标题:【转帖】MTT实验两年心得

DCS[使用道具]
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发表于 2015-8-12 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

读了大家的帖子又长知识了。
我现在刚开始做，想请教大家个问题：
1.我用酶标仪测的时候，设置参数的时候，设了调零孔（里面加的含血清的培养液、MTTT、DMSO、还有溶解药物的介质），然后出来的调零孔OD值一直是零，我也看过他们发的帖子，也有提这个问题的，想确认一下，这样有问题吗？
2.还有，调零孔颜色为浅紫色，这正常吗？
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kswl870[使用道具]
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发表于 2015-8-12 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

开始做MTT一周了重复了三次结果都不好，有几个问题想请教：
1、我的调零孔OD值一直偏大（里面加了无血清培养基、MTT、DMSO），最高能接近1，不知原因出在哪里
2、一般调零孔设几个？
3、培养基中的酚红对结果影响大吗？
4、加MTT前是否取出原先刺激的培养基对结果影响大吗
5、预先设计药物刺激24小时，MTT是在实验结束后再孵育4小时，还是实验结束前4小时加MTT
问题较多期盼各位高手的答复
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jude[使用道具]
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发表于 2015-8-12 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室 培养的是T细胞 是悬浮生长的， 每次从镜下看 实验组比对照组 细胞明显增多， 可是颇膜后 570测OD值， 实验组都比对照组低， 怎么会这样呢？
因为是悬浮细胞， 破膜前 都是2000转 10分钟，但是细胞还是不能很好的贴壁，还是需要很小心的将上清吸去， 然后加DOSM,
请高手能够指导一下 谢谢！
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