PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】抗凝血DNA的提取

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 39  3/4 ‹‹1234››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】抗凝血DNA的提取

baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
21

发表于 2015-8-31 18:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA抗凝可直接买EDTA抗凝真空抽血管，好处是方便，并且抽血体积固定，并且EDTA抗凝液在管臂混合均匀。
顶部
purrr[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72864
精华 0
积分 362
帖子 384
信誉分 100
可用分 2786
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
22

发表于 2015-8-31 18:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们用的是ACD一般抗凝剂，效果不错
但我最近做了一批标本，手工操作（不是用kit），结果样本之间的OD260/OD280比值差异很大，最好的在1.85左右，最差的只有1.2左右，且比值差的浓度一般也较低。
请问大家可能有什么原因呢？
我是刚来的，请多关照！
顶部
memory[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76531
精华 0
积分 378
帖子 436
信誉分 100
可用分 2962
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-7
状态 离线
23

发表于 2015-8-31 18:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1，我用EDTA抗凝用你提供的方法可以么？
2，STE是什么？如何配置？
3，第5步加SDS多少？25-30ml?,不是吧？
谢谢诸位！
顶部
vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
24

发表于 2015-8-31 18:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA抗凝用2.5%的溶液，与血液之间体积比一般是1:10

=============================================================================================================

以前我们实验室一直用肝素抗凝，PCR效果也不错。但考虑目前反对用肝素抗凝的呼声越来越高，我们也考虑用EDTA抗凝。老板让找这方面的资料。不知你所说的有无出处，能告诉一下吗？ 老板是个治学严谨之人，讲究有根有据。还请你帮个忙。
顶部
vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
25

发表于 2015-8-31 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

前两天，试着用两种方法，提取库存冻血的DNA。冻血标本DNA提取前，一定要室温水浴溶解，然后加磷酸盐缓冲液，离心，弃上清。往沉淀中加入提取缓冲液，再温育1小时。以后的步骤同新鲜血液的DNA提取步骤。
顶部
jude[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72164
精华 1
积分 599
帖子 754
信誉分 102
可用分 4721
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
26

发表于 2015-8-31 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA抗凝可直接买EDTA抗凝真空抽血管，好处是方便，并且抽血体积固定，并且EDTA抗凝液在管臂混合均匀。

===================================

能否告知那里有卖？价钱多少？非常感谢！
顶部
jude[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72164
精华 1
积分 599
帖子 754
信誉分 102
可用分 4721
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
27

发表于 2015-8-31 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
准备用EDTA抗凝真空管抽血用于提取DNA，哪位老师知道哪里有卖，请告知。多谢！
顶部
H2O[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77273
精华 0
积分 434
帖子 547
信誉分 100
可用分 3566
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
28

发表于 2015-8-31 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA抗凝真空管在大医院的化验科或材料科有卖的，一些医药用品专销店也有，天津医科大学总医院是这样。
顶部
xyw5[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75137
精华 1
积分 620
帖子 815
信誉分 102
可用分 4991
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
29

发表于 2015-8-31 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

EDTA抗凝用的是2%的溶液，一般0.2ml可加1ml全血。
顶部
jude[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72164
精华 1
积分 599
帖子 754
信誉分 102
可用分 4721
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
30

发表于 2015-8-31 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 xyw5 于 2015-8-31 18:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

EDTA抗凝用的是2%的溶液，一般0.2ml可加1ml全血。

谢谢！能否给出：那本书上写的？老板非要看到书才行。有劳了。
顶部
 39  3/4 ‹‹1234››