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标题:【求助】实时荧光定量PCR污染问题

txwuyan[使用道具]
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发表于 2015-9-1 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用Sybr Green法在35cycles以后，阴性对照出现起飞属正常情况，这时可能是引物二聚体的影响，可配合熔解曲线进行分析。
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txwuyan[使用道具]
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发表于 2015-9-1 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
也有可能是探针或者rox降解造成。
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eric930[使用道具]
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发表于 2015-9-1 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的只有管家基因出现污染扩增，而目的基因的ntc没有出现污染，这什么原因？请教各位
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xyw5[使用道具]
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发表于 2015-9-1 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做了两个月了，污染一直不能解决。因为是在别人的实验室做的，没有那么好的条件，到现在还没避免污染，真郁闷。
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2015-9-1 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
以前做定量的时候，我记得稀释样品都是到顶楼去稀释，还要选有风的日子，稀释完了头发也完了，整个一个疯子
还真的这样做？太有趣了吧，有这个必要吗？^_^
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queen[使用道具]
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发表于 2015-9-1 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在一搜定量PCR污染的帖子，都是比较久远的，但是看一看，还是有种归家的感觉。
痛苦的太久了，越来越觉得自己是个粗人
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vcve[使用道具]
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发表于 2015-9-1 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

也是啊。。污染，，阴性的。。。。。。
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iii_ii[使用道具]
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发表于 2015-9-1 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的实验是多重PCR ，在加入了人体的管家基因球蛋白的探针引物等内参扩增后，其他有一个通道都出现了荧光信号，全部阳性，两次，重新合成也是，不懂是为什么了
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