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标题:【求助】PCR产物电泳条带为什么被“劈开”了？

toy[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是国外论文的原文地址：cuturl('http://circ.ahajournals.org/cgi/content/full/95/12/2628')，在 Figure 1 上。
我也会尽快和作者联系一下的。
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toy[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

该篇论文的责任作者所留的信箱好像已经作废了，发邮件老是被拒收，怎么回事？
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
试试问问第一作者～
第一作者：Groenemeijer BE
1997、1999年发文章之后，2008年才发另外一篇，真可谓十年磨一剑
cuturl('http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=18711614')
Correspondence to: B.E. Groenemeijer Department of Cardiology, Gelre Hospitals, PO Box 9014, 7300 DS Apeldoorn, the Netherlands Email: E-mail: b.groenemeijer@gelre.nl
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fox_79[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
怎么一会480kb一会480bp 么看懂啊
引物特异性差 这个基因内部也存在互补位点 所以出现两条带(其实是一条带 只不过有个长有个短而已)
所以二者 中间都含有酶切位点 酶切完之后都是一样的 所以出现上述结果?
有可能吗? 我猜的
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fox_79[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果实在较真的话 你完全可以测个序啊 花不了多少money
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爱老虎游tt[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

kb是我笔误，抱歉！应该是488bp，已改正
如果引物特异性的原因，造成长短不同的两种链，那么它们酶切以后的片断怎么会长度一样呢？我想这种情况只能出现在x/x基因型的结果中，这种基因型酶切以后会有一个几十bp的小片断，电泳的时候可能从胶里跑出去了观察不到。如果引物特异性造成的长度差异就发生在这个小片断内，那么酶切的时候被切掉，可以得到和正常PCR产物酶切后一样的结果。但是这种情况并不适用于另两种基因型。
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那位外文的第一作者一直没给回信。
如果我要测序的话，在北京找什么公司比较好？
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minran_1980[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是因为你的产物部分变性，有单链和双链，电泳时所以有两条带，酶切前又复性了，所以酶切结果是正常的。
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minran_1980[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
分别送去测序就明白了,不用去猜什么
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ero11[使用道具]
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发表于 2015-9-1 18:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大家要积极讨论啊~
DNA的硫修饰就是因为跑胶时的拖带而发现的哦~
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