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标题:【求助】RNA 电泳出现4条带,不知道什么原因

xevin[使用道具]
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发表于 2015-9-4 17:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议楼主到下面的网址请教核酸抽提专家：Big Smile
核酸抽提：质量检测电泳照片的判读经验谈 (最好附照片) - 丁香园论坛
相信会得到更满意的答复
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ha111[使用道具]
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发表于 2015-9-4 17:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

典型的没有处理好DNA，Trizol加少了。
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am10[使用道具]
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发表于 2015-9-4 17:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是降解了
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veiwu[使用道具]
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发表于 2015-9-4 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关疾病：
先天性卵巢发育不全综合征
回答楼主和94520425，
照片上有6条带，4，5，6三条我认为是28s，18s，5s，而2，3通常也会出现，应为很弱（如a3）不被重视，分歧就在1带，RNase处理后1也消失，因此否定了我认为最大可能的基因组DNA，那么就可能是蛋白，但我想楼主操作时不会带入这么多蛋白吧（这点我不能肯定，因为b3、b4、b5亮度均高于a3、a4、a5，而b1却弱于a1），如果排除蛋白，那a1就可能是RNA的二级结构，不同构象电泳速率也是不同的。
65度保温5分钟后冰上急冷，RNA二级结构打开再电泳，就应该是三条带了。
同意chuyi2008的观点!全面,有道理!
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发表于 2015-9-4 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

希望楼主能在各位战友的帮助下找到真正的原因，更希望楼主把这个原因告诉大家，期待中……
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发表于 2015-9-4 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢各位战友！
我提的是大鼠的肠道组织，图片在附件中

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个人经验:
各位分析很有道理,但本人感觉对DNAase的处理不敢认同,我们经验发现有些商家的DNAase质量不好,包括RNAase配置不当后处理条带全无.所以个人认为可以设置control比一切猜测更好.对于DNA污染的control可以用同中基因组DNA点样外加MARKER,28S RNA的位置就很容易确定了.若有质量不错的总RNA样品更好了(实际许多kit中带有controlRNA,拿来用).另外,你的电泳时间不知长否?最好快速电泳.仅供参考!!
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seagate[使用道具]
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发表于 2015-9-4 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

28S上面的条带是hnRNA,即RNA前体，在植物组织的RNA中比较常见。提得好一般能看到。
不是DNA，DNA一般在泳道，出不来。
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langlang[使用道具]
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发表于 2015-9-4 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位战友！
后面用trizol提rna没有出现此种情况，但是用QIGENE试剂盒提取还是同样的出现了四条带。怀疑是否是试剂盒的原因
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