生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】关于国内狂犬疫苗生产和研发的现状和瓶颈...

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 13  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】关于国内狂犬疫苗生产和研发的现状和瓶颈...

ritou1985[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77664
精华 0
积分 644
帖子 948
信誉分 100
可用分 5596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
1

发表于 2015-9-5 15:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】关于国内狂犬疫苗生产和研发的现状和瓶颈...

我们生产的是vero细胞培养的狂犬疫苗，最大的问题就是残余DNA的去除，想了很多办法均不理想，比方说离子交换层析啊，请各位老师指点迷经。再就是我们残余DNA检测方法已经比较成熟，标准梯度很好，有需要的老师可以交流一下。
顶部
eor[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117906
精华 0
积分 392
帖子 484
信誉分 100
可用分 3226
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
2

发表于 2015-9-5 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
现在狂犬的瓶颈主要还是残余DNA与HCP吧，以前把主要的精力放在了用什么方法去除收获液/浓缩液中的DNA，采用柱层析确实比较难以满足，有采用DNA酶处理的，现在应用的挺多的。在就是在整个的生产工艺进行控制，从细胞、毒种、培养工艺着手，尽可能的减少vero细胞DNA和HCP的释放！一起探讨啊！
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
3

发表于 2015-9-5 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在国内一些大公司，如成大，长生，其vero细胞狂犬疫苗的指标已经符合标准了吧，其生产还有瓶颈吗？
生产技术应该过关了吧？
lz所属哪家公司？
顶部
ritou1985[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77664
精华 0
积分 644
帖子 948
信誉分 100
可用分 5596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
4

发表于 2015-9-5 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

成大的狂苗确实符合标准，这主要是因为该公司是全面引进的国外成套的毒种和灌培养技术，其灌培养阶段病毒积累非常高，残余DNA释放相对更少，这样相对减轻了纯化的压力，用现有的纯化工艺即可达到要求。这也提示我们，去除DNA应从病毒培养收获阶段想想办法，尽量减少细胞破碎，尽量增加病毒积累量。这对宿主蛋白的去除也有好处。
顶部
nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
5

发表于 2015-9-5 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能跟下游的纯化工艺有关，如果先浓缩再层析就会有问题，因为浓缩的过程中DNA会缠绕结合在病毒表面。所以如果能改工艺的话，可以将收获液澄清后直接上离子交换层析，再进行后续纯化，DNA残留应该就能达标了
顶部
feiya[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117889
精华 0
积分 247
帖子 234
信誉分 100
可用分 1911
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
6

发表于 2015-9-5 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DNA问题还没解决吗？应该基本都能解决了吧，新版药典都出来了啊。多数是靠加酶，少部分上游培养用反应器做，效果也很好啊。控制好了，在细胞凋亡前收获，DNA会少很多。
顶部
eor[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117906
精华 0
积分 392
帖子 484
信誉分 100
可用分 3226
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
7

发表于 2015-9-5 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

补充一下吧，加酶处理确实是一个解决方法，但能否受到国家认可也是未知吧，关键点应该还是在上游培养，减少DNA的释放，还有战友提到了浓缩，这个确实是个问题，像成大的毒株其免疫原性比较好，根本不用做大倍数的浓缩，其下游纯化的压力就比较少，采取柱层析的方法即可。
顶部
whitesheep[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78856
精华 0
积分 825
帖子 1330
信誉分 100
可用分 7476
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-4
状态 离线
8

发表于 2015-9-5 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

要么就试试CHT(羟基磷灰石)，给你找个文献参考一下。
Bioprocess (JFebruary 2010)有一篇《A Ceramin Hydroxyapatite-Based Purification Platform》可供参考，原文地址我是找不到了
顶部
mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
9

发表于 2015-9-5 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在有种填料是混合机理的，也可以尝试一下，不过效果应该没加酶好。
顶部
zzzz[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74598
精华 1
积分 656
帖子 967
信誉分 102
可用分 5638
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
10

发表于 2015-9-5 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个谁能帮你，这简直就是保密的东西。
顶部
 13  1/2 12››