【求助】离子交换分析电荷变异体

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标题:【求助】离子交换分析电荷变异体

is2011[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位好，我现在在做一个单抗，我们单抗的质量标准中，电荷变异体一项有规定Sub-1应小于等于，Sub-2应小于等于，R-1应小于等于。请问有知道Sub-1，Sub-2，R-1代表什么意思的吗？

october7[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 is2011 于 2015-9-7 11:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

各位好，我现在在做一个单抗，我们单抗的质量标准中，电荷变异体一项有规定Sub-1应小于等于，Sub-2应小于等于，R-1应小于等于。请问有知道Sub-1，Sub-2，R-1代表什么意思的吗？ ...

我猜的
Sub-1，代表第一分支产物
Sub-2，代表第二分支产物
R-1代表第一步反应物

49888[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 october7 于 2015-9-7 11:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我猜的
Sub-1，代表第一分支产物
Sub-2，代表第二分支产物
R-1代表第一步反应物

既然是离子交换分析电荷变异体，sub-1/2大概是碱性变异体、酸性变异体么？
楼主可多提供些信息。

veiwu[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

分析电荷变异体如果需要高通量的话，离子交换显然不是首选，最好上基于IEF技术的iCE3(Protein Simple公司），好使、靠谱！

www.1[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 veiwu 于 2015-9-7 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

分析电荷变异体如果需要高通量的话，离子交换显然不是首选，最好上基于IEF技术的iCE3(Protein Simple公司），好使、靠谱！

分的东西不一样，一个net charge，一个surface charge，ls有做过实验验证了么？

牢骚科科长[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 www.1 于 2015-9-7 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

分的东西不一样，一个net charge，一个surface charge，ls有做过实验验证了么？

??
没有疑问的是：IEF和IEX-HPLC都可以用来分析单抗的电荷变异体。但是至于是否是“分的东西不一样，一个net charge，一个surface charge ”，却是值得商榷。
我由于也不敢太确定，就在网上查了一下，查询结果貌似显示，两者都是基于蛋白的静电荷进行分离的。参考文章可见：
cuturl('http://userpages.umbc.edu/~dfrey1/documents/vhpionex.pdf')
摘录几句关键点：
Ion-exchange chromatography separatesproteins by charge primarily through electrostatic interactions between chargedamino acid side chains and the surface charge of the ion exchange resin. Proteinretention has been explained as a "netcharge" phenomenon in which a protein is considered to be a point chargeand retention is a function of the netcharge of the protein at the pH of the mobile phase.
上面第一句也提到了”surfacecharge”, 但是这个是指离子交换树脂的表面电荷。
欢迎大家评论、讨论！

nn255[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

离子交换肯定不是net charge,跟蛋白微环境下的侧链基团和resin的作用有关，在IEF中才是这个。
ps,楼主的帖子很有意思，自己的质量标准起了一个自己都不认识的缩写名称吗？

is2011[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

标准不是我们单位起的，是从外界获得的。

131415[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 牢骚科科长 于 2015-9-7 11:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

??
没有疑问的是：IEF和IEX-HPLC都可以用来分析单抗的电荷变异体。但是至于是否是“分的东西不一样，一个net charge，一个surface charge ”，却是值得商榷。
我由于也不敢太确定，就在网上查了一下，查询结果貌似显示，两者都是 ...

IEC-HPLC肯定不是net charge，与蛋白表面电荷分布有关，且与IEC填料基质性质有关；
相同的net charge，若电荷分布不同，IEC-HPLC可能会表现不一，但IEF表现一致；
相同表面电荷分布，相同填料带电基团，但填料基质性质不一，IEC-HPLC也会不一。

abc816[使用道具]
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发表于 2015-9-7 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看上去还是IEF靠谱啊，
问题是如需进行后续表征研究，IEF怎么回收样品呢？

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