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标题:【求助】人血白蛋白生产中热原的消除方法有哪些啊

zbboom[使用道具]
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【求助】人血白蛋白生产中热原的消除方法有哪些啊


在生产中人血白蛋白中热原的消除方法主要有哪些啊 求告知
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www.1[使用道具]
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关键看工艺是怎样的
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ldh[使用道具]
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方法有很多。我们先来看下你需要怎么做。
1、首先你要知道你的热源是哪里来的,发酵带进来的还是纯化过程引入的?
2、确定来源之后,你可以找到相应的步骤去去除,如果是前期引入的,那么你在纯化过程中是完全有能力将他去除的,典型的就是阴离子交换。由于热源多数是带负电荷的,因此可以在碱性或者中性条件下过阴离子去除。
3、如果是发酵带入的,那么你在前期预处理时可以加入适量的活性炭来去除,活性炭有良好的去除内毒素功能,具体操作可以问厂家。
4、同样的,热源(内毒素)是个混合物,分子量分布很广,利用分子量不同可以有效的去除一部分。
供您参考!
因为这是通用技术,在目前很多的蛋白药物中经常会碰到这个问题的。但是白蛋白由于剂量大,问题相对突出,一定要注意生产过程中的控制。最好能跟踪一下,到底哪里引入的,做一下预防。
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既然提到是人血白蛋白,那肯定是从血液中逐级分离了,那主要是过程控制,保护好样品暴漏环境级别、注射用水、设备清洗、器具的NaOH的浸泡、管道清洗、纯化系统的清洗等等。
要是重组类的,大肠杆菌本身就是来源源,一般某个纯化步骤要具备去除内毒素的能力,但是你的白蛋白应该不是大肠杆菌表达的,那就不用刻意考虑。
要是已引入,短期想去除,我建议Q-FF层析流穿模式可以考虑。如果不行,考虑采用Q膜,很多膜公司现在都有,即使在高盐下也可以直接过,对样品损失一般不大,但膜价格较贵,适合应急使用,不建议作为去除工艺使用。
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gmt[使用道具]
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既然提到是人血白蛋白,那肯定是从血液中逐级分离了,那主要是过程控制,保护好样品暴漏环境级别、注射用水、设备清洗、器具的NaOH的浸泡、管道清洗、纯化系统的清洗等等。
要是重组类的,大肠杆菌本身就是来源源,一般某个纯化步骤要具备去除内毒素的能力,但是你的白蛋白应该不是大肠杆菌表达的,那就不用刻意考虑。
要是已引入,短期想去除,我建议Q-FF层析流穿模式可以考虑。如果不行,考虑采用Q膜,很多膜公司现在都有,即使在高盐下也可以直接过,对样品损失一般不大,但膜价格较贵,适合应急使用,不建议作为去除工艺使用。
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纠正一点,重组的HSA一般用酵母表达系统,谢谢。
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原帖由 gmt 于 2015-9-9 11:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
既然提到是人血白蛋白,那肯定是从血液中逐级分离了,那主要是过程控制,保护好样品暴漏环境级别、注射用水、设备清洗、器具的NaOH的浸泡、管道清洗、纯化系统的清洗等等。
要是重组类的,大肠杆菌本身就是来源源,一般某个纯 ...

恩,我的意思是,重组HSA不可能用大肠表达,如果大肠表达系统的,一般需要考虑内毒素问题。
重组HSA酵母表达的,目前也非常谨慎,主要考虑安全性问题
武汉一家采用植物表达系统表达HSA的,概念很好,但是目前推的也不是太快。
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gmt[使用道具]
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原帖由 bring 于 2015-9-9 11:37 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

恩,我的意思是,重组HSA不可能用大肠表达,如果大肠表达系统的,一般需要考虑内毒素问题。
重组HSA酵母表达的,目前也非常谨慎,主要考虑安全性问题
武汉一家采用植物表达系统表达HSA的,概念很好,但是目前推的也不是太快。 ...

是的,表达系统多样性是必然发展的趋势。
其实,只要生产过程中严格控制外源内毒素的引入,正常的工序下来,产品的内毒素都会合格的
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wawa[使用道具]
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原帖由 bring 于 2015-9-9 11:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

既然提到是人血白蛋白,那肯定是从血液中逐级分离了,那主要是过程控制,保护好样品暴漏环境级别、注射用水、设备清洗、器具的NaOH的浸泡、管道清洗、纯化系统的清洗等等。
要是重组类的,大肠杆菌本身就是来源源,一般某个纯 ...

还是建议用Q膜吧。 白蛋白用药剂量大,对内毒素限值很低。Q膜的处理能力比柱层析还是要好很多。另外白蛋白生产规模大,工艺时间也是个要考虑的问题,Q膜的流速比柱层析要高很多,可节省不少时间。
至于使用成本的问题,则不一定比柱层析高。至少用Q膜就可少用一个层析柱,要知道一个生产用的层析柱的钱购买多少填料啊。
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bring[使用道具]
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原帖由 wawa 于 2015-9-9 11:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

还是建议用Q膜吧。 白蛋白用药剂量大,对内毒素限值很低。Q膜的处理能力比柱层析还是要好很多。另外白蛋白生产规模大,工艺时间也是个要考虑的问题,Q膜的流速比柱层析要高很多,可节省不少时间。
至于使用成本的问题,则不一 ...

一次的问题肯定建议用Q柱了,如果每次都是这样就要用层析填料了,或者你别的项目使用Q填料的,可以借用一下。
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wawa[使用道具]
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原帖由 bring 于 2015-9-9 11:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

一次的问题肯定建议用Q柱了,如果每次都是这样就要用层析填料了,或者你别的项目使用Q填料的,可以借用一下。

你不同项目上用的填料,还能拆借着用吗?这能符合法规要求吗?
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