小中大不知楼上的结果,原研和样品比较是偏酸还是偏碱?
以前做过PNG-F酶切之后,样品整体往酸性端移动,IEC和CIEF结果都是这样。CPB酶切之后,只是K的峰降低了,位置不变。
如果是K的影响,那二者的主峰很可能是k0和K2(3min差异)的差别,不过主峰一般都是K0吧,至少我碰到的都是这样
如果二者都经PNG-F酶切之后还是相差很多,那真不可能是Fc端-N糖。。o糖?
静待楼主的进一步研究结果
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比原研药偏酸。 PNG-F处理后 N变成D,整体往酸性端偏移,但仍保持三分钟的差异。K我没做,因为是整体偏移,而非主峰偏移,酸碱性峰都有相通差距,故不认为是K的影响。 之后做了肽图,肽段存在差异。脱糖后的肽图几个肽段仍有差异。排除N糖影响。O糖还未试。 有考虑做肽段覆盖率,确认氨基酸序列是否发生了突变。