【求助】摇瓶发酵的细胞到第九天开始结团怎么办？

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标题:【求助】摇瓶发酵的细胞到第九天开始结团怎么办？

vcve[使用道具]
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发表于 2015-9-9 16:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近做摇瓶发酵实验，CHO悬浮细胞，发酵到第九天细胞密度在2X10E7的密度，33度降温培养的开始出现结团现象，越往后结团越严重，到了第十一天已经非常严重了，到第十一天收样检测表达量在2g左右的。请问各位有什么好的方法没有？F68和英俊的抗结团也试过了，效果不明显啊！求赐教~~~~~

gmt[使用道具]
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发表于 2015-9-9 16:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

2*10E7，在摇瓶里能长到这么高？！我又孤陋寡闻了...

qqq111[使用道具]
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发表于 2015-9-9 16:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 vcve 于 2015-9-9 16:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

最近做摇瓶发酵实验，CHO悬浮细胞，发酵到第九天细胞密度在2X10E7的密度，33度降温培养的开始出现结团现象，越往后结团越严重，到了第十一天已经非常严重了，到第十一天收样检测表达量在2g左右的。请问各位有什么好的方法没有？F6 ...

你降温的目的是什么呢？你有没有做过37度不降温对照比较的？有没有检测过从第九天到十一天的产量增加趋势，这里可以看到细胞生长有没有异常。
有两个方面你可以考虑一下，第一是37度条件下培养比较，2X10E7的密度不算很高的。第二，从培养基补料着手考虑，是不是培养基中某种营养成分缺失了。高密度的细胞培养需要高营养的培养基，这个点很重要。

bring[使用道具]
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发表于 2015-9-9 16:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有些细胞就是喜欢结团呢，有可能是种子不行，有时候细胞状态不好，产生的碎片也会引起结团

莲花白[使用道具]
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发表于 2015-9-9 16:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在培养初期可以添加一些抗结团剂，这个有商品化的可以买得到

BUK[使用道具]
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