小中大在下现在在优化液相条件，用流动相为A：10mM甲酸铵水溶液，加0.1%甲酸；B：甲醇：水（95:5），加2mM甲酸铵和0.1%甲酸，测10种氨基酸的混标，试了很多种梯度都不能把样品很好地分开，而且峰形也很差，如图所示是其中一个梯度，实验室师姐之前用过的，我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循，感激不尽！
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楼主 针对氨基酸组分的检测：
①分离度一般用洗脱程序调节难度系数过大，但其分离度一般同流动相酸度、
柱温箱温度关系较大；
②目前，氨基酸组分的检测主要采用的是HPLC柱前衍生法检测，效果不错，
可同时检测多种(可达20多种)组分；
③看楼主给出的图谱，貌似使用液质检测吧，若使用液质，不衍生可直接检
测氨基酸组分，即可定量、定性，其实不用太在乎分离度，关键是总离子
谱图在选择离子谱图提取时，提取出的谱图能够分析，便于定量、定性即可。
