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标题:【求助】关于缓冲盐作为流动相的问题

xuuuu[使用道具]
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1
 

【求助】关于缓冲盐作为流动相的问题

最近遇到一个问题,我用的缓冲盐作流动相,在做完样品的时候,我一直不理解,为什么要用纯水先冲洗?
PH,低于5%,对C18键没有影响吗?请哪位大侠解释下。

我自己操作是,样品做完,直接流动相冲,然后甲醇水 9:1 。最后甲醇冲洗。
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BUK[使用道具]
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流动相中缓冲盐的正确使用方法
1. 使用前的处理:
在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗
的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含
缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓
冲盐溶液时)流动相进行分析时,如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小,
不先冲洗掉,接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大,而其比例中所含的水又不足以溶
解该缓冲盐时,缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出,沉积下来,这将可能导致上述对色谱柱的损害。
2. 使用后的处理:
用与分析时含水比例相同的流动相(与分析用流动相唯一的区别是,用于冲洗的流动相不含缓冲盐)进
行冲洗约 30min,直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用,要长期保存,则需再加
上一步,即用纯的有机溶剂冲洗一遍,直至基线平稳。
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小米虫子[使用道具]
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可以不用纯水冲,楼主的做法我认为比较合理。纯水对C18键有一定影响,但跟PH没太大关系。
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假小子[使用道具]
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你的缓冲盐浓度有多大?
不建议用纯水洗,用5-10%的甲醇/水洗,完了再用纯甲醇洗就可以了
纯水伤柱子
甲醇水 9:1   应该是甲醇-水=1:9
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xuuuu[使用道具]
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首先我要对2楼的朋友说,谢谢你的详细解答,但是我还是不是很明白,
然后我纠正下,我提问题的有误,   PH  5%,     应该是有机溶剂浓度所占的的比例5%。
甲醇水:1.9。   这是我提问错误,不好意思。
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蓝蝴蝶[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 xuuuu 于 2015-9-24 11:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
最近遇到一个问题,我用的缓冲盐作流动相,在做完样品的时候,我一直不理解,为什么要用纯水先冲洗?
PH,低于5%,对C18键没有影响吗?请哪位大侠解释下。

我自己操作是,样品做完,直接流动相冲,然后甲醇水 9:1 。最后甲醇冲洗。  ...

为什么要用纯水先冲洗?
这个问题对于楼主显然是多余的了。
你的做法是对的!!!
PH,低于5%,我没有算过来到底是多少。
不过,看样子应该是略略有点酸性。用肯定是没问题,如果楼主用完了后也有好好地洗柱子的话,应该没什么的!
至于你底下说的为什么还是不明白,还请把你的不明白说的明白点
这样大家才可以真正的帮你弄明白!!
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王六六[使用道具]
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不见意用纯水冲柱子,时间长了对柱子不好。
还以5-10%的甲醇为好。
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xuuuu[使用道具]
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我在一个国家检验标准上面看见的,用缓冲盐作为流动相,后面清洗的时候,要先用水冲,
我一直不明白,为什么要用水冲,用水冲的话,很容易引起系统不平行。
请大家帮我讨论下,到底用水冲好,还是不用水冲好,为什么一个标准上面建议先用纯水冲。
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ladyhuahua[使用道具]
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他们认为这样最好
但是,要根据实际的操作来啊!
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bongte[使用道具]
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我建议用纯水冲洗原因就是
你想想缓冲试剂中的盐可以被有机试剂溶解吗?
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