小中大请问能保证只加一个A吗?
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当然,这是由酶的性质决定的
加A是聚合酶的不依赖模板的末端转移酶活性造成的,这种活性是在按照模板合成完互补链后在3’末端添加一个碱基。在ACGT四种核苷酸存在时,优先选择A。在只有一种碱基可供选择时,则添加该种核苷酸。
于是发明了利用平端酶线形化载体质粒然后用Taq酶加T的T-vector技术。