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标题:【分享帖】赛百胜公司GOLDVIEW核酸染料使用心得

西子[使用道具]
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【分享帖】赛百胜公司GOLDVIEW核酸染料使用心得

用这个东东有半年多了,也积累了一些经验,我想有些xdjm可能也发过一些,做试验累得要死,也懒得搜索雷同了,说说我的感受,希望对大家有用
1、尽管毒性不比EB,但它对皮肤还是有腐蚀作用的,这是用的过程中师兄师姐的感受,道听途说,但戴手套操作还是保险一些,呵呵
2、这个东东是带正电荷的!我敢保证我说的正确。在250V高压条件下,20min后这东东能移走10cm没问题,这就是有个帖子说胶的前后亮度不同的原因,因为远离点样孔的那一端goldview已经跑没了!
3、这东东稳定性很差的。跑过两次的胶可能就没有多少染料了。对于这个现象它不如EB好。不过如果有懒一点的或者时间宝贵没时间作胶的人,可以在远离点样孔的那一端缓冲液里加一些goldview,效果蛮好。
4、最最重要的,惨痛教训!!!也是我写这篇东东的目的所在!今下午又吃了一次亏呢Sad 什么呢,
goldview对RNA没有任何的显色能力!!!。实际上这是很大的问题。鉴于EB的强致癌作用,很多明智的老板在选用goldview的时候基本上就废止了EB的生存空间。但对于RNA试验来说,这无疑是致命的。第一次提RNA的时候就用goldview跑,结果什么都没有,气了好几天,结果今下午终于知道原因了,不知咱RNA提的不好,是染料的原因啊!各位提RNA的同学一定要小心这个东西啊!——RNA杀手!!!
就说这么多吧。原则上讲,为健康着想,goldview还是值得肯定的Approved
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EB在电泳时候也会向阴极泳动。
若要避免前后亮度不同,可以采用后期染色的方法。
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zhenxin[使用道具]
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对RNA有染色效果的,我们提取总DNA,电泳跑到前面的RNA带N亮!用Goldview据说毒性比EB弱,不过我想不明白,还不是和EB一样要插到分子内部才能有用,怎么会不致癌了。由于众兄弟姐妹对EB的恐惧,我们实验室跑胶的地方分两种电泳槽,分别跑没有加染料的胶和加了Glodview的胶,前者拿到专门开辟的一个小地方在EB溶液中染色,后者就能直接看。
我觉得Glodview和EB的区别:1、想象中没有那大毒性(谁都没有做过试验来验证,还不是产家说的),心理比较好想;2、分辨率绝对没有EB高;3、如果象我们实验室的这种做法,比较节省时间,省确了染色的那一步,对我这种心急气躁的人比较有利。
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join[使用道具]
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我用博大泰克的,好像也不错,百维信的也不错,没用过赛百胜的。好像我们这没有代理。
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ladyhuahua[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 西子 于 2015-10-7 10:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
用这个东东有半年多了,也积累了一些经验,我想有些xdjm可能也发过一些,做试验累得要死,也懒得搜索雷同了,说说我的感受,希望对大家有用
1、尽管毒性不比EB,但它对皮肤还是有腐蚀作用的,这是用的过程中师兄师姐的感受,道听途说,但 ...

前三点我都认同,版内以前也有同样观点的讨论贴和整理贴.
第4点,你说goldview对RNA没有任何的显色能力!!!。
呵呵,不正确吧!
我提取的酵母RNA都是用goldview染色,下面贴得有相片,虽然RNA提得不是很好,但是不关goldview的事.goldview不是RNA杀手.至于你没有发现着色带,可能是RNA没有提取出来.要不,你再验证一下.
如果说goldview不能着色RNA,主要是指变性打开二级结构的RNA,比如做杂交变性的.但EB同样也对这样的变性RNA无能为力.
为goldview正下名,毕竟它自己不会说话.还望楼主别见怪.


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qhyu[使用道具]
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我是广州的,我最近问了几家公司都没有EB卖,请问在哪里能买到?或是能否自己配呢?我也怕GOLDVIEW经不起考验!
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moonlight[使用道具]
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GOLDVIEW很明显就是丫啶橙,
这个我三年前就发帖子证实过了.
致癌性不比EB差,所谓比EB安全完全就是骗人的.
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kuaizige[使用道具]
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我们用的正是赛百盛的GOLDVIEW核算染料,RNA着色一点问题都没有,效果确实没有EB好,但可以接受。其自带说明书说致癌性比EB低,由于才使用3年,没能确证这一说法(而且平时接触的毒性致癌性物品那么多,哪知是单独作用还是共同作用引起)。
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西子[使用道具]
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如果说goldview不能着色RNA,主要是指变性打开二级结构的RNA,比如做杂交变性的.但EB同样也对这样的变性RNA无能为力.

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噢,我也在纳闷,但我做的RNA电泳有两种情况,一是用新配的goldview琼脂糖胶检测,结果跑出来跟你的图谱差不多,拖着一点尾巴,并且很暗,我以为是降解了,吓出一身冷汗,结果去隔壁实验室跑了个EB的琼脂糖电泳,没有任何降解的痕迹。这一次还没意识到是goldview的事,第二次又用goldview跑,跑出来结果18S28S都没有,再跑EB才恍然大悟。
或许是别的什么原因吧,偶做实验也是比较马虎的,不过有了这些经验,现在都不用goldview的,宁可冒险用EB,思想上重视一点,也不会有什么危险的。
建议楼上用EB跑一下RNA,可能图片会漂亮很多
BTW:图怎么是绿色荧光样的?〉
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ladyhuahua[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 西子 于 2015-10-7 10:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
如果说goldview不能着色RNA,主要是指变性打开二级结构的RNA,比如做杂交变性的.但EB同样也对这样的变性RNA无能为力.

...

(呵呵,你唤偶兄,偶就兄一次吧)用EB重整一次了.至于图是绿色的,是因为我拍照时没用滤光片.原始的相片.
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