液质联用

大家在做液质联用方法开发时，对LC梯度设置有什么见解？
比如：
            A（H2O）  B（ACN）

0.01min   90         10

0.6min    90         10

1.6min    10          90

2.0min    10          90

2.1min    90          10

2.5min    90          10

对这个梯度，你一般会选择哪一段时间作为化合物的出峰时间？

讨论：

1.认为出峰时间适合优化在，0.6-1.6min，梯度洗脱增强，峰型好；

2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min，高有机相，雾化好，响应高，精密度好。

大家都是怎么考虑的？或者有经验的给点原理性解释？

无所谓，分子极性大小不同，自然保留不同，没必要也没办法强制一个极性大的分子在高有机相的时间区域出啊！
我觉得只要保证待测物有保留，所有待测组分都冲得出来，对于更注重定性（甚至是快速定性）的LCMS来说，就是一个好的梯度方法。

您这是HILIC柱子用到的程序吗？？还是您A和B上面标示弄反了啊？1min时间增加这么快啊？做残留的话，估计基质效应很强啊

我觉得1+2都可以啊，CAN是什么？

在一些常规化合物中，可能并不需要去考虑这些。
在方法开发时，什么是你优先考虑？在遇到一些拖尾严重的化合物时，又没有合适的色谱柱时，你会怎么优化LC呢？
希望大家可以分享一下经验，共同讨论讨论。

如果方法开发时遇见峰拖尾，通常简单判断一下原因，是否是色谱柱走样时间长了，脏了；还是开发质谱方法后，化合物在管路中残留（有的化合物喜欢残留）；排除后，正常出峰拖尾严重，可能是流动相PH值不匹配，先调梯度看能不能解决，再用常见的FA,醋酸铵，氨水之类的摸一摸化合物的酸碱性，不行，还可以试挥发性离子对试剂。
有时换根类型匹配的柱子就可以解决，还是换柱子方便啊

这个梯度很有意思,起始的流动相配比是多少,为什么要加一个0.01min90:10的流动相配比?在遇到严重拖尾时可以考虑用缓冲溶液来调整峰型,乙酸,甲酸,在不连质谱的情况下可以加磷酸效果可能会更好。

讨论：

1.认为出峰时间适合优化在，0.6-1.6min，梯度洗脱增强，峰型好；

2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min，高有机相，雾化好，响应高，精密度好。

大家都是怎么考虑的？或者有经验的给点原理性解释？

我也认为1+2均可以，但请充分考虑2点：
1、梯度延迟，对于1或2的情况，实际出峰时间等于时间1或2+梯度延迟时间；
2、以实际实验中的信噪比为准，充分考虑基质效应等问题，一般情况，我更偏向于第2种情况。

关键看你的检测目的是什么，如果追求高灵敏度低检测限，那就选择相应高的，其实关键还是要看基质和干扰，以能够排除其他物质干扰为主要选择因素。其实我觉得做液质不用考虑这些太细节化的东西，把被测化合物从基质中分离开，排除干扰，提高灵敏度才是最重要的