小中大【分享帖】电泳图的阅读体会-(心得)初学者必读
惭愧,电泳后出现异常情况,最后发现系配错胶浓度,才算有点真正理解琼脂糖凝胶电泳!或者说真正看懂书,可惜这些细节就是没人教,可能就是所谓的个人领会。在这里共享,以助初学者理解。唉,本来做实验就不是专业,这几个月一边做一边学。真希望能看到高手的体会、分享。但反过来想想,要是我很懂了,可能会以为这些很简单大家都懂,也不会发帖提醒。所以在这里慢慢总结这次错误。自己思考,也希望多少对大家有帮助。
基本概念(出现错误后才真正能理论联系实际)
溴化乙锭(EB)是制胶时混在胶中,载样缓冲液(含溴酚蓝染料)是电泳前才同样本混合的。
正确电泳后拍的照片,仔细观察可以发现,点样孔侧(阴极)较白,而另一侧则较黑,两者之间有一分界线。其实显示白色的胶内含EB,而黑色的胶内则EB已迁移,所以EB是胶呈白色的原因。此分界线为EB在电场作用下向阴极移动的前沿。分界线的点样孔侧有一排黑色条带,只有在点过样本的点样孔列出现,无样本的列则无此黑色条带。此黑色条带为溴酚蓝在照片中的位置。