小中大夸张啊，有那么贵么？当然，如果你啥都要买，那肯定很贵了，但如果比如有的试剂实验室是有的，用不了那么多。而且靶基因验证三个实验就够。
1、楼上提到的荧光定量PCR可以省掉，除非你想看看是不是发生1-5%概率的转录水平调控。所以这个不做的话直接从UTR验证开始。因此，UTR区克隆，然后做luciferase实验。这个需要常规的基因克隆费用不多，要买mimics需要几百元钱，如果你能构建过表达的miRNA，这个mimics都可以省了。但luciferase试剂贵些，1万多10个，所以话说回来来，如果你需要从头买，很贵，但如果实验室有，用不多的话，不贵。一般1瓶约10ml量，可以测约400个孔。你自己可以算成本。
2、UTR验证正确后，还要做突变，再做一次luciferase，看看是不是真的具有结合作用。这给费用可以参考上边。
3、western：如果UTR验证正确，可以做western验证，这个要买抗体，如果你能买到小包装就很便宜，1-2000元，如果没有，一般打折抗体只要不是很不常见的那些，3000-4000元，可以使用N多次。如果你实验室正好有这个抗体，这个是不用花费的。当然，这部分还要ECL试剂，稍微贵些，2000元左右。
4、最后一步就是过表达或者敲除你靶基因重新看看是不是与miRNA功能相同，这个分子生物学实验，不贵。
所以，综上所述，如果你啥都没有，1.5-2万彻底搞定。如果你有些基础，根本用不了这么多。
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感觉你对这方面很在行啊，呵呵。我也想做miRNA靶基因的验证，就用一个双荧光素酶报告基因系统，能不能给我个具体的操作步骤呢，谢谢了！
