【求助】用血球计数板来确定细菌数量

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标题:【求助】用血球计数板来确定细菌数量

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发表于 2015-10-13 15:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

想用血球计数板来确定细菌数量那种显微镜合适由于近期要做一点生物试验，物理灭菌类的，涉及到确定细菌数量，看到一些文章中提到可以采用血球计数板法来实现，所以想来问问需要配那些附件，重点是什么样的显微镜合适，最好有牌子和型号，这样对于我这样的门外汉就是莫大的帮助了，非常感谢。

dadaai[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不知道你需要计算的那类细菌啊？比较大的细菌使用常规的光学显微镜就可以实现了，不需要特定的牌子或者规格什么的来着。至于血球计数法，你可以查一下方法，网上应该有很多的。

大大[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

想用显微镜来计数金葡大肠和绿脓

双子座[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我确实没听过可以拿细胞计数板确定细菌数量的，你做的是什么样品，要是可以融到水里，就可以拿琼脂平板计数，要是是表面涂抹的话，就得涂抹之后再弄到液体里，再拿琼脂平板计数。金葡可以用这个方法，大肠的话用MPN法，有相应的3M纸片，直接用就是，绿脓没做过，不知道！希望对你有帮助

大花猫bb[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对了，至于显微镜，普通光学显微镜理论上是可以看到细胞计数板上的细菌，即使油镜也没问题，这个国产的和进口的都差不多，都是可以看得。

huali[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

您说的表面涂抹的方法我们现在遇到的问题就是，涂抹到表面后等风干后处理，发现不处理的也都死光了，所以很头痛，现在就是想找可以改进或替代的方法，谢谢

大嘴猴[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个很简单的，只需要能用油镜的光学显微镜就行了。
但是细菌不染色的话，在油镜下可能会显示的不好。
细菌活细胞染色法我是用过的，但是我用的是荧光显微镜。
还有一种方法，就是不需要细胞计数器，是通过一种算法，显微镜下每个视野的面积是可以算出来的，滤膜的面积也是可以算出来的，假设细菌在滤膜上是均匀分布的，那么用油镜视野下下细菌的数目可以推算出细菌的数目，这个误差可能会比较大，一般需要求10个以上视野的平均值。

yuanyuan[使用道具]
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发表于 2015-10-13 15:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一般用Olympus的荧光显微镜，放大到40*10倍（物镜*目镜）即可，将菌液（适当稀释）染色，滴至血球计数板，低倍下找准位置，再放大倍数，数落到中方格子里面的细胞数目（染色后在荧光下发荧光很容易辨认），一般10个一下比较合适，细菌数过多要再稀释，。注意的是计数区的刻度有两种（16个中方格和25个中方格），具体操作看说明即可。