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标题:【求助】冻干粉复溶问题

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发表于 2015-10-14 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】冻干粉复溶问题


实验用到进口瓶装一蛋白，5ug/瓶装。可是每次复溶后的浓度差异很大，导致后续实验无法开展。请教对于这种微量的冻干粉复溶有什么注意事项没有？
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vera+[使用道具]
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发表于 2015-10-14 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

首先确定浓度是否真的是差异很大；
如果是，就调查原因：
溶剂的量
蛋白的量
溶解后是否会分解等
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vera+[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就认为每瓶就是5ug
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发表于 2015-10-14 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

离心，复温至室温复溶。量这么少，浓度也比较难测准吧。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
该蛋白是进口的，每瓶标示量是5ug，需要复溶做实验，后来的办法是将几瓶全部复溶至一起再做实验，结果就一致。但重新复溶几瓶再做实验就不出结果了，所以问题应该还是蛋白复溶环节出的问题。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
离心，只有30kd啊，转速能否建议一下。
复温，可以一试。谢谢
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
离心，复温至室温复溶。量这么少，浓度也比较难测准吧。

=======================

你有这方面的资料吗？
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Ao7[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
首先确定浓度是否真的是差异很大；
如果是，就调查原因：
溶剂的量
蛋白的量
溶解后是否会分解等
......

================================================

目前的情况是一瓶按常规方法复溶后残留蛋白都够做实验。
有稳定性数据支持在短期内不会分解。
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
实验用到进口瓶装一蛋白，5ug/瓶装。可是每次复溶后的浓度差异很大，导致后续实验无法开展。请教对于这种微量的冻干粉复溶有什么注意事项没有？

===========================================================================

首先应该判断该蛋白是否同一产地的同一批号？如果是，那就断定浓度是一致的，查找实验操作。
如果不是，那差异很正常。实际装量、冻干前的浓度差异（+/-10%）都会导致复溶浓度的差异。
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Ao7[使用道具]
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发表于 2015-10-14 16:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yizhi 于 2015-10-14 16:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
实验用到进口瓶装一蛋白，5ug/瓶装。可是每次复溶后的浓度差异很大，导致后续实验无法开展。请教对于这种微量的冻干粉复溶有什么注意事项没有？

====================================================================== ...

是同一厂家，同一批号的产品。
因为一瓶基本上只够做一次实验，故采取复溶几瓶混一起分不同时间做几次实验，结果就一致，所以排除操作方面的误差。
然后又因为上次复溶混的蛋白已经用光，所以重新复溶混几瓶，用新复溶混一起的蛋白做实验就出现异常，而且这个结果已经重复两次都是一样的异常结果。
所以问题应该还是复溶后蛋白浓度差异引起的问题
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