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标题:【讨论帖】讨论

c86v[使用道具]
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相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征
DMEM里面本来就是哈有氯离子的 Calcium Chloride (CaCl2) (anhyd.) 111 116.6 1.05045
Potassium Chloride (KCl) 75 311.8 4.157333
Sodium Chloride (NaCl) 58 6995.5 120.61207 (加盐酸制造的盐应该很少吧,我没有算过,1l培养基加2N盐酸180ul)
先调PH再定容吧。
细胞可耐受的渗透压应该是280-320吧 记不清楚了。
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cocacola[使用道具]
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Hepes是维持培养液的酸碱平衡的,我培养液时一直都用HCL调PH。一般都是先调PH在定容》
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chengjie79[使用道具]
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前天晚上配培养基,刚配出来的偏酸,我用1N的NaOH调,居然加了快4ml,才刚刚到7.0,惊讶中,不知道这样养出来的细胞什么样!等有了结果我再告诉大家!

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基本上加入碳酸氢钠之后,刚配出来的培养基都是偏碱的……你的怎么回事偏酸呢? 是什么培养液啊?1640? MEM?
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chengjie79[使用道具]
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Hepes是维持培养液的酸碱平衡的,我培养液时一直都用HCL调PH。一般都是先调PH在定容》

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定容之后,那么PH 不就又改变了吗?
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chengjie79[使用道具]
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Hepes是维持培养液的酸碱平衡的,我培养液时一直都用HCL调PH。一般都是先调PH在定容》

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定容之后,那么PH 不就又改变了吗?
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定容后的PH改变是可以忽略的。
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基本上加入碳酸氢钠之后,刚配出来的培养基都是偏碱的……你的怎么回事偏酸呢? 是什么培养液啊?1640? MEM?

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我们这里印象中dmem的培养基,无论高糖还是低糖,还是f12,配出来的都偏酸,以前是直接加NaOH片调的ph值,这次用的溶液NaOH调的。
可能和我们的双蒸水偏酸有关!
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我们是用HCl和NaHCO3进行调定pH的,可是培养基经常在4℃中就会偏碱,所以就使用HCl调,但基本上在第二天在使用时,培养基又回到昨天的颜色(偏碱)(使用pH计进行测定的)。所以很想知道哪种方法可以长期保证调定后的培养基pH基本不变。
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QUOTE:
原帖由 join 于 2015-10-15 15:29 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我们是用HCl和NaHCO3进行调定pH的,可是培养基经常在4℃中就会偏碱,所以就使用HCl调,但基本上在第二天在使用时,培养基又回到昨天的颜色(偏碱)(使用pH计进行测定的)。所以很想知道哪种方法可以长期保证调定后的培养基pH基本不 ...

1.请问你们的HCL和NaHCO3是如何进行无菌处理的。谢谢
2.根据我看的资料,好像hepes的缓冲能力很强,但是没有见过配好后的培养基用hepes调ph值的。呵呵,我有很多的hepes,不知道如何使用,除了配培养基的时候用那么一点点,甚至现在培养基里已经添加有了hepes,真的不知道该如何充分利用hepes。
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定容后的PH改变是可以忽略的。

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请问这样的说法有依据吗?谢谢
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