细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】讨论

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 86  3/9 ‹‹123456789››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】讨论

greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
21

发表于 2015-10-15 15:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室没人这么干，主要原因是我们实验任务繁多，培养基消耗速度快，所以PH改变的培养基较少，同时，我们培养基进行了50毫升的分装( 用于少量使用或消耗速度较慢的实验），还可以减少污染。对于楼主的问题，我个人觉得，不要使用HCl，因为不知道HCl对于细胞本身有无危害，其次引入cl-离子会不会产生其他问题等等
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
22

发表于 2015-10-15 15:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 greenbee 于 2015-10-15 15:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们实验室没人这么干，主要原因是我们实验任务繁多，培养基消耗速度快，所以PH改变的培养基较少，同时，我们培养基进行了50毫升的分装( 用于少量使用或消耗速度较慢的实验），还可以减少污染。对于楼主的问题，我个人觉得，不要使用H ...

我以前分装的是250ml，现在分装为100ml了，目的和楼上 战友的一样！
顶部
loli[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71788
精华 0
积分 736
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6650
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
23

发表于 2015-10-15 15:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室也是使用100ML的瓶子分装的，也是为了避免污染。
怎样能保证培养液pH值啊，只要能保证一周基本不变就可以？
有没有培养肠上皮细胞的战友啊？
顶部
ALALA[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77477
精华 0
积分 671
帖子 1002
信誉分 100
可用分 5901
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
24

发表于 2015-10-15 15:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的理解是：可以加。但是一定要控制量，不要加进去过多造成原来成分的稀释。我们做胚胎培养液时候是这样的。
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
25

发表于 2015-10-15 15:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

记忆中以前看的帖子，用的最多的好像是NaHCO3调的，但是没有战友把NaHCO3得浓度和配方以及灭菌方式跟大家分享的。
希望有战友能够分享，谢谢先！
顶部
小明[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 118015
精华 0
积分 193
帖子 126
信誉分 100
可用分 1376
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-9
状态 离线
26

发表于 2015-10-15 15:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的是二氧化碳调PH值
顶部
eor[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117906
精华 0
积分 392
帖子 484
信誉分 100
可用分 3226
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
27

发表于 2015-10-15 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
个人认为是可以用Hcl调pH的，不过调节后没有缓冲能力，如果放的时间长的话还是会变碱，并且加入的量不宜过多，以免引入的cl离子对细胞的影响。
顶部
seagate[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 114508
精华 0
积分 601
帖子 922
信誉分 100
可用分 5343
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
28

发表于 2015-10-15 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们就是按照配方,用NaHCO3,整袋DMEM或1640,从来没用过盐酸，也基本不调PH值，滤器滤完PH值就是正常值。一般三个月内用完细胞没问题的。
顶部
vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
29

发表于 2015-10-15 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的经验：
干粉的培养基，按照包装袋上说明要加的NaHCO3的量，一般配好的是偏酸（因为使用的是优普的纯水机，过滤导致水偏酸），加入NaOH调整pH7.2~7.4，有时候是7.4~7.6。
过滤除菌，200ml分装储存，临用前加血清（加血清会使得培养基略微偏酸，pH约为7.4左右）。如果一个月内用完应该不会发生明显变碱的事情。
顶部
idea2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77656
精华 0
积分 552
帖子 783
信誉分 100
可用分 4726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
30

发表于 2015-10-15 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞培养基的pH调解中最好不要添加其它的物质，因为有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质，以免影响培养基的缓冲能力。培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg ～320 mOsm/kg。一般要用碳酸氢钠调节pH值，NaHCO3 为另外添加，若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH 之误差，或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合，然后用CO2气体调整pH，而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH)，因为氯离子对细胞生长可能有影响，且贮存时培养基的pH 易发生改变。加入NaHCO3 0.75g～1.00g调节PH值至7.0，定容1L，加入1g NaHCO3的培养基 pH约为7.0--7.2，此时就不需要再调节pH值了。
顶部
 86  3/9 ‹‹123456789››