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标题:【求助】衰老相关β - 半乳糖苷酶染色

koook5695[使用道具]
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我也用碧云天的试剂盒,感觉大部分都染上颜色了。
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c86v[使用道具]
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不要用石蜡切片了,染不上的。用冰冻切片染吧。
有谁能提供组织染色的评分方法吗?
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summerxx[使用道具]
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我们实验室都是现用现配的,买的碧云天的试剂盒(C0602),常用的就分装放在4℃,其他的可以-20保存。
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zhenxin[使用道具]
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我也用的碧云天哒,H2O2 280uM刺激24h,染完,也没多少阳性的衰老细胞啊
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summerxx[使用道具]
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关注中,我用的CST的染色试剂盒,也没多少阳性细胞
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qiangren789[使用道具]
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我也碰到同样的问题,冻存后复苏的 第三代mef,外型上已经开始不成形,铺的很开了,第四代已经有明显老化的形状出现。但是
??
β - 半乳糖苷酶染色 染不出阳性结果,不知道原因是神马~
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hyuu[使用道具]
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我的细胞都被染上蓝色了,但不是整片的,而是很多颗粒不是很清楚,请教是什么原因呢?
我用的cell singaling 的试剂,放显微镜下观察时,需要将染色液去掉并PBS 洗吗?为什么背景也是蓝色的呢?
提前谢谢各位大虾了。
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hyuu[使用道具]
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正准备购买试剂盒,做相关衰老的实验。学习一下。
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xiaoxiaoniao[使用道具]
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你好!
我正在做组织的X-gal染色,感觉效果还可以。
我的染液配好后,不用过滤,但要调pH值=6,避光4度保存,随时间的延长液体会变得越来越黄,并没有发现你说的蓝色颗粒,简易这样的染液最后不要用了。
衰老的细胞会染色更深,核固红复染,400倍拍照可以看得很清楚。试试吧,欢迎交流
......

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您好,您做的核固红复染用的核固红染色液配方是什么?是核固红与去离子水?还是核固红与硫酸铝?铝离子对X-gal染色有影响吗?
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zbs[使用道具]
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我的细胞都被染上蓝色了,但不是整片的,而是很多颗粒不是很清楚,请教是什么原因呢?
我用的cell singaling 的试剂,放显微镜下观察时,需要将染色液去掉并PBS 洗吗?为什么背景也是蓝色的呢?
提前谢谢各位大虾了。

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显微镜观察之前需要将染色液去掉,并用1×PBS洗版两次
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