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标题:【讨论帖】MTT法和CCK－8法，那个好？

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发表于 2015-10-17 09:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个以前讨论过的。
MTT：步骤有点烦琐，中间有吸液的步骤会造成不可避免发误差，特别是加DMOS前的一步，会吸走不少的结晶，后来改进了方法，用2%SDS-HCL溶结晶，不需要去培养基，但是必须37度过夜，耗时比较长。另外MTT反应，这一步，至少需要3小时，如果要做某个药物的急性作用，用这个方法就不太好了。
CCK-8：是MTT的改进，步骤简单，中间不需要吸出孔内的培养基，这样就减小了误差，另外CCK-8反应时间也短，最短1个小时就够了，特别适合做急性作用。还有CCK-8对细胞生长没有影响，测完细胞活性后，去掉含CCK-8的培养基，用新鲜培养基可以继续培养，并且还可以继续做其它指标的检测。MTT就不能。
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发表于 2015-10-17 09:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也用的是上海同人的,确实有点贵.但效果很好,每次检测标准曲线都比较一致.但上周课题讨论,一个师兄建议要优化我培养细胞的显色时间.所以用的更多.不知道有人做过没有.我培养的是小胶质细胞.
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发表于 2015-10-17 09:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你说的那个1块板300多的有没有搞错啊，我用同仁的10块板才1200啊，还比你说的LDH便宜。
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发表于 2015-10-17 09:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人认为MTT做贴壁细胞还勉强可以,CCK-8比较适合于做悬浮细胞,不需要离心机了
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发表于 2015-10-17 09:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
药疹
cck-8觉得做药物毒性比mtt要好，毕竟对细胞没有杀伤。cck-8虽然贵，但是能得到好的结果，也值得了，毕竟我们研究生时间而是有限啊。呵呵
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发表于 2015-10-17 09:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

说实在的.我一直在寻找细胞增殖实验的新方法,因为有的方法,虽然被国际上认可,但毕竟要考虑到仪器设备及技术能力而不能行,最经典的MTT实验虽然价廉当然效果也可以,但毕竟太老了,我们实验室有个人用MTT方法发IF5分的杂志,其中被拒稿的原因之一就是方法太老.
上海同仁的cck-8方法简便有效,比mtt操作起来更方面，比mtt好很多，不破坏细胞，不影响其他实验,而且被国际上认可,贴一个近年来用此方法发的IF大于10的文献目录,希望对大家有帮助.
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发表于 2015-10-17 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
头痛

我的实验涉及淋巴细胞增殖和细胞毒性杀伤部分用的是CCK-8，我感觉CCK-8显色稳定，重复性好，检测数值在做统计学处理时不会让人头痛。
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发表于 2015-10-17 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我最近做了MTT也做了CCK8，感觉cck8虽然是贵了点，但是操作起来要方便的多，而且数据看起来比MTT的要好些，但是有种比CCK8性价比更好的alarm blue价格比CCK8便宜的多，国外用的比较普遍，操作起来也比较方便，发文章也不像MTT受限制,说明书上说要继续培养4－6小时，但是我们实验室有做的加试剂1－2小时也 可以测，具体时间自己可以摸索一下，效果比CCK-8还要好，强烈推荐！！
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发表于 2015-10-17 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼上的说得不敢苟同，alarm blue价格你可以问一下比CCk-8贵的多,
同样我最近也做了MTT及同仁的CCK-8，由于后者的性价比高，操作简便，不损伤细胞，其细胞可用于其他实验如用培养液冲洗后，可消化下来做免疫组化，没有影响，我对比过，而且价格也不算太贵，所以我推荐CCK-8
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发表于 2015-10-17 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
MTT分析发的步骤比较多也比较繁琐，比如MTT粉末和溶液保存时都需要避光，用铝箔纸包好。
MTT形成的结晶用普通的DMSO溶解 ，我们做的过程中遇到了麻烦：
1： 去上清后加入100ul的DMSO, 感觉不能很好的完全溶解
2：每次做的结果有很大差异，不稳定，和镜下观察的结果也不一致。不知道该相信哪一次的结果。
3：我的师妹做三氧化二砷诱导HEPG2和7721细胞凋亡的实验，用MTT听说没有得到理想的结果，后来又听她说用那个CCK-8试剂合做了，结果还是比较好的。后来老板就让我们淘汰了MTT,改用CCK-8了。
其实大家也可以亲自做个比较就知道那个好了。
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