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标题:引物的Tm值计算要不要包括不与模板配对的碱基啊

微笑的海豚[使用道具]
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发表于 2011-9-20 13:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不算的！  
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微笑的海豚[使用道具]
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发表于 2011-9-20 13:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
个人意见，开始的十个循环采用配对的TM，以后的二十个采用引物全长的TM-5。这样可以保证特异性扩增特别是对于克隆用的PCR.
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浆果儿cc[使用道具]
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发表于 2011-9-20 13:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
开始时PCR反应的主要模板是样品DNA，所以不应该算入；反应后面的循环的模板主要是扩增的产物，会发生配对，所以要考虑，特别是５’端添加碱基很长的话。  
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