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标题:[未解决]煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶？？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
mico_11[使用道具]
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发表于 2015-10-19 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶？？

淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗？

     导师让我从乳酸菌发酵液中提完粗酶以后，去煮沸一个小时在跑电泳，说煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶，但是我实在找不到这个方法的理论依据，不知道怎么弄，希望大虾们帮个忙
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花花[使用道具]
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发表于 2015-10-19 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
煮沸，其它蛋白变性了，淀粉酶耐高温，煮沸不会变性，变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了，就这么简单。
理解两点：
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性，淡粉酶是耐高温的蛋白，不会变性。
2.变性的蛋白会凝集起来，离心过过滤就除掉了
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发表于 2015-10-19 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象，那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧？
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fantacy[使用道具]
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发表于 2015-10-19 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看你要求的纯度，你煮过后在离心，离心后跑个SDS-PAGE看看，根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关，一般煮下纯度70-80%纯度是有的，杂蛋白还是有的。
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hey_bye[使用道具]
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发表于 2015-10-19 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
煮后酶活增加正常，杂蛋白没了，葡萄糖苷转移酶也没了，测的酶活自然就高了。祝顺利
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