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标题:[未解决]大家做硅胶柱层析纯化时，装好的柱子是重复利用么？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
落叶无声[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家做硅胶柱层析纯化时，装好的柱子是重复利用么？

1，大家做硅胶柱层析纯化时，装好的柱子是重复利用么？还是一次性的。感觉每次能纯化的物质非常的少，要是每次都重新装柱特别麻烦，但是若不重新装，要把所有的东西都洗脱下来 耗费大量洗脱剂，而去一般最后的洗脱剂极性都是非常大的，是否把所有东西都洗脱下来后 还要用初始洗脱剂进行洗脱（这样才不改变柱子最初的极性）。
2，这样的柱子是不是说明拖尾比较严重呀？要怎么办才好呢
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倾尽温柔[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
硅胶都是一次性的。没见谁重复利用过。你可以试验后分享一下。你的柱子不是拖尾。红色部分不能说明分离效果，甚至可能没什么东西。一切以TLC的情况判断分离效果
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舞疯[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我确实是重复利用了，只是感觉浪费好多洗脱剂。然后 我分离的是色素， 光谱扫描初步看应该是分开了几种物质，只是感觉分界有点模糊，不晓得大家跑的柱子都是什么样的。没看到别人做过，所以不晓得“对”是个什么样子
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翔少爷[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不要装那么长的柱子。百来毫克级别的长径比不超过15，十几克往上的甚至可以低于3。柱子装紧，敲打结实是关键。多花时间用TLC筛选溶剂。
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小米粒[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
正相硅胶都是一次性的，反相可以重复使用。
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发表于 2015-10-19 13:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是装了柱子，放了一个晚上，感觉也没怎么下降就用了。上样量与硅胶比 1：10，我想问下是不是好的分离是一截一截的，中间没有什么其他物质，这样收集比较方便点。其实这个分离的和TLC结果差不多，就是时间 太长了。是不是用制备型的TLC还好些
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kaixinjiuhao[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做色素用硅胶可能吸附比较大，损失多。粗分完了后头多用用凝胶，效果应该很好。
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大球球[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
纠正一个误区，硅胶是可以回收利用的，但实验室没有回收的条件，所以一般直接一次性，然后扔掉。就算回收，绝不是楼主那么回收的，你用大极性溶剂洗脱过后，溶剂就会被吸附到硅胶上面，用小极性的是不能置换大极性的溶剂的，所以你那种回收的方法是绝对不行的，你那种方法就算能用，也不再是吸附色谱了，有可能变成液液分配色谱了。
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美丽婷婷[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
柱子上面肉眼能见的色带只能作为参考，还是要小体积接收，然后薄层层析确定合并，严格的讲，薄层层析后，在254下面看了还要显色剂显色再看，之后才能合并。
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双_视野[使用道具]
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发表于 2015-10-19 13:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我看到有层主在谈高径比的问题，小柱子可以看看，作为参考，但大柱子就不要管高径比了。我装过直径20㎝、高20㎝的，也装过直径10㎝、高200㎝的，还装过直径5㎝、高30——50㎝的，装柱主要看硅胶的粒度和分离材料的薄层行为。
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