细胞世界

这个方法里有个错误。吸取细胞层以后不可能用1400g这么大的离心力去沉淀细胞。这个参考文献的作者我特地写信去问过了，他承认是他们发在增补刊上的分离方法中写错了（具体文献名我不记得了，只记得文献是先发的，方法是后来增补刊的，好像是HEPATOLOGY）。应该是400g沉淀细胞，1400g梯度离心。 至于其中的灌注时间，我记得酶液好像是各4分钟，文献里有讲到。我也做这个，希望和大家多讨论

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请问，为什么不能用1400g的离心去沉淀细胞？本质上，这个操作只不过是为了让所有的细胞都沉淀下来，那么这个离心力只要能够达到沉淀的目的就可以的。400g以上都可以，没有硬性规定，我认为。

请问，为什么不能用1400g的离心去沉淀细胞？本质上，这个操作只不过是为了让所有的细胞都沉淀下来，那么这个离心力只要能够达到沉淀的目的就可以的。400g以上都可以，没有硬性规定，我认为。

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如果这样的话，为什么不用高速离心，比如15000g呢，那样不是可以离心时间更短，更快吗，可是好像一般做细胞的文献上沉淀细胞都是300-600g，太大离心力下细胞会死吧，至于多大算大，我没做过实验，没对比过，1400g是不是大？会死多少？我也不知道，我只是按照一般做法来做的。至于说400g以上都可以，这个说法好像不太准确吧。我们这里其他人做细胞的，有的只用300g，甚至250g离心沉淀细胞，时间稍微长点，应该也有他们一定的道理吧。个人观点。

要这么大的离心力吗？我们一般离心细胞就300-500g，还请版主赐教。以前就经常向版主请教，在此先谢过了：）

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我现在所在的实验室前面一个人用的差不多就是这个速度，不过，我最近改到做大鼠的450g了。

如果这样的话，为什么不用高速离心，比如15000g呢，那样不是可以离心时间更短，更快吗，可是好像一般做细胞的文献上沉淀细胞都是300-600g，太大离心力下细胞会死吧，至于多大算大，我没做过实验，没对比过，1400g是不是大？会死多少？我也不知道，我只是按照一般做法来做的。至于说400g以上都可以，这个说法好像不太准确吧。我们这里其他人做细胞的，有的只用300g，甚至250g离心沉淀细胞，时间稍微长点，应该也有他们一定的道理吧。个人观点。

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是的，离心力大确实会机械损伤细胞。我上面的提问重点只是想说，在合理范围之内，400g离心和1400g离心，结果似乎没有太多的区别（别的细胞不知道是什么情况，最起码小鼠的HSCs上是差不多的，因为2个我都试过了），这个问题类似于到底是400g离心沉淀好，还是500g离心好。个人观点。