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标题:【求助】求助

nn255[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

降低optiprep的密度
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发表于 2015-10-20 12:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 nn255 于 2015-10-20 12:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

降低optiprep的密度

我分别尝试了，10.5%（1.061）；10%（1.059）；9%（1.053）三个密度，随着密度降低HSC得率下降很快，纯度并不理想。觉得降低密度并不是好的纯化方法。
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

I will isolute HSCs.In the literatrueBlushsolation and Culture of Hepatic Stellate Cells(Ralf Weiskirchen and Axel M. Gressner),Collagenase H (0.23 U/mg) means 0.23u collagenase I to 1mg liver tissue.
thanks
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

for isolution of HSCs,Do you had centrifugated total liver cell suspension with percoll gradient?
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

solution I Is D-hanks?Solution II is Hanks?
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我下个月就会开始做了，并且到时有一位好心的老师会亲自演示给我看。
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whitesheep[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很无语，看了帖子，从头到尾就是纠结于400g和1400g，实践是检验真理的唯一标准
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koook5695[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问灌注前不用打肝素吗？具体剂量和从哪里打效果怎样啊？还有肝脏要消化到什么程度呢？完全烂成浆糊状貌似细胞活力很低啊！请各位多指教了！
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ukonptp[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问灌注前不用打肝素吗？具体剂量和从哪里打效果怎样啊？还有肝脏要消化到什么程度呢？完全烂成浆糊状貌似细胞活力很低啊！请各位多指教了！

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不需要肝素
消化程度自己摸几次预实验就会知道
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bojitu[使用道具]
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发表于 2015-10-20 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不需要吗？文献里不是说如果有血栓很影响灌注效果的吗？我是用percoll纯化细胞的，效果不是很稳定，而且这个实验步骤多，一个流程下来细胞出不来很难说是哪步的问题，所以想请教下各位消化程度要怎样，就是肝看起来是什么样的，有文献里说要消化成浆糊状，包膜和实质分离，可是消化到那个程度再percoll就很厚碎皮层，其他层没有，不确定是消化问题还是percoll问题，请各位帮帮忙，排除了消化的问题我好再分析percoll的问题。多谢了！！！
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