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标题:DNA用什么方法定量最准确 ？

韩梅梅[使用道具]
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发表于 2011-9-21 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我知道紫外分光光度定量对DNA定量是不准的

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你从哪看来的。
紫外分光光度计对DNA定量是准的
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金手指[使用道具]
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发表于 2011-9-21 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
检测HBV-DNA的 方法 是用PCR还是斑点杂交法准确？哪种方法假阳性高？主要影响因素有哪些？  
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邓布利多[使用道具]
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发表于 2011-9-21 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是吗？很多文献上说作为定量PCR的模板不准，可我需要的是相对比较，可以吗？
内参是不是管家基因
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发表于 2011-9-21 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你从哪看来的。
紫外分光光度计对DNA定量是准的

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赫赫。紫外分光定量的确的确是非常不准的，特别对微量的dna，我建议如果条件允许，用pico green来定量。
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雷子![使用道具]
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发表于 2011-9-21 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用紫外分光法检测核酸浓度的关键在于分光光度计的性能。我们原来用DU640，由于它的线性范围在0.01以上而通常我们提取的DNA浓度都比较低，所以检测的时候机器常常是工作在0.01附近，这样就导致同一个样本会检测出几种不同的浓度。最近我们换用了一种新的紫外分光光度计，只需要1ul的样本，并且十分稳定，线性工作范围0.001。这样的检测结果让我们十分满意。我们是用购买的标准品做样本的。
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发表于 2011-9-21 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你从哪看来的。
紫外分光光度计对DNA定量是准的

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哦,是吗,紫外分光光度计对DNA定量是准的的吗,那么GENEQUANT怎么样.?!
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发表于 2011-9-21 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道你们的定量范围是多少，反正我用pico Green和fluoromark( Bio rad)可以达到100ng/ml。 就是0.1ng/ul。 分光光度计可以吗？按照pico green的说明书，最高可以达到25pg/ml！
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发表于 2011-9-21 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我知道紫外分光光度定量对DNA定量是不准的，可是只要做为我们这批实验的共同模本以它为标准品画标准曲线，来测某基因的相对拷贝数，同时与正常相比，可以吗？
你说的内参是不是管家基因，主任？

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内参跟管家基因也不能等同，大多数内参是用管家基因做的，有的也不是。
紫外分光光度定量DNA在一定范围内还是很准的，但是不适合定量PCR。不能直接采用分光光度测得的样本浓度来作标准曲线。至少需要解决两个问题：第一，样本是否纯化，第二，怎么得出样本中目的基因的拷贝数？
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发表于 2011-9-21 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道你们的定量范围是多少，反正我用pico Green和fluoromark( Bio rad)可以达到100ng/ml。 就是0.1ng/ul。 分光光度计可以吗？按照pico green的说明书，最高可以达到25pg/ml！

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我们定量的范围一般都在ng/ul或以上，没试过低于ng/ul的情况。如你所说，用一些特殊的荧光染料的确可以做到比较灵敏，不知道这些染料的价格如何？需不需要特殊的方法和仪器？样本量需要多大？
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长发piaopiao[使用道具]
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发表于 2011-9-21 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道你们的定量范围是多少，反正我用pico Green和fluoromark( Bio rad)可以达到100ng/ml。 就是0.1ng/ul。 分光光度计可以吗？按照pico green的说明书，最高可以达到25pg/ml！





请问什么是pico Green和fluoromark( Bio rad)?
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