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标题:[未解决]红外测固定化酶二级结构

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
youyusharan[使用道具]
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红外测固定化酶二级结构

近期要做固定化酶Nov 435经一系列特殊液体处理后的构象变化,采用红外定量分析二级结构的方法。涉及的液体沸点较高(150℃左右),凝固点约为-10℃,粘度较大。红外分析制样要用哪种方法?若采用压片法,冻干与研磨过程是否会对酶蛋白产生额外的影响?请教各位专家,谢谢!!
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fjdlgldg[使用道具]
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酶合着溶剂,涂在在KBr片上做做看···
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gamewang[使用道具]
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直接用ATR做就行了
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eesa_dc_seein[使用道具]
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减压除去液体,适当干燥KBr,应该不会导致立体结构转变
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nancy7752[使用道具]
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浓度大的液体直接用膜法试试
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youyusharan[使用道具]
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如果酶合着溶剂,涂在在KBr片上做,我采用的预处理的液体结构比较复杂,跟酶蛋白的峰会有部分重叠(我主要用到的酰胺1带没有重叠),我用同样方法做这个液体的红外谱图,然后用subtraction,subtraction后的图与未经处理的Nov 435谱图·对照,可不可以达到我的分析目的,即经过该液体预处理后酶蛋白二级结构的变化。我觉得理论上可行,就是想在操作前问问各位专家,如果红外样品不纯净,各组分的峰有一些重叠,用subtraction能不能得到我想要的图,诚心请教,谢谢各位!!
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fjdlgldg[使用道具]
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可以的,不过做出来的差谱可能会很难看,不太准确···

QUOTE:
原帖由 youyusharan 于 2011-9-23 10:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
如果酶合着溶剂,涂在在KBr片上做,我采用的预处理的液体结构比较复杂,跟酶蛋白的峰会有部分重叠(我主要用到的酰胺1带没有重叠),我用同样方法做这个液体的红外谱图,然后用subtraction,subtraction后的图与未经处理的Nov 435谱 ...

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