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标题:【求助】请教分析方法验证中的的几个疑问？

@木木@[使用道具]
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发表于 2015-11-2 09:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请教分析方法验证中的的几个疑问？

请问分析方法验证中的范围是如何做的。
七、范围
范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。原料药和制剂含量测定，范围应为测试浓度的80%～120%；
比如样品含量测定为10mg/g，那么范围是不是直接说8～12mg/g，还是要做个8mg和12mg的样品？
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发表于 2015-11-2 09:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
7．耐用性
　　分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20％以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于2.0，杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离；各条件下的杂质含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在±0.1％以内。
另外如果耐用性中提取次数时间的选择还有流动相的变化在提取条件选择试验和色谱条件选择试验中做了的，还需要再做一次吗。每个条件都必须测定两次吗？
上文（有关物质分析方法验证的可接受标准简介 ）中“各条件下的杂质含量数据（n=6）”n＝6是哪个6？
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发表于 2015-11-2 09:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
另外准确度的RSD要求98.0%-102.0%，这个是否太高了。见下文。
含量测定分析方法验证的可接受标准简介
审评四部 黄晓龙
    摘要：本文介绍了在对含量测定所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
    关键词：含量测定 分析方法验证 可接收标准
   
    在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005年颁布了分析方法验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
    1．准确度
    该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。
    可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。
……
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发表于 2015-11-2 09:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
to:第一个问题,当然要做,做了才知道这个范围符不符合要求.
to:第二个问题,我觉得做过了可以不做,n＝6是指6批实验数据
to:第三个问题，平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，对化学药应该能达到，中药可能比较困难．
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 小中大
谢谢版主。
第一个问题，我是说如何做范围，那是不是要做个含量测定时含量的80％和120％的样品，再检查它的什么指标呢？系统适应性吗，还是看在不在线性范围？
第二个问题，哪6批数据呢？流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20％以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定，这样算的化如果每个条件只做一次，共有13个数据，如果每个要做2次，那么共有26个数据。这里的6个数据是指哪6个呢？
还是指比如流动性变化-5％，流动性不变化，流动性变化+5％各做两批，这样就有6个了，是不是指这个6？
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发表于 2015-11-2 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
平均回收率均在98.0%-102.0%之间，我们基本都难做到。图片点击可在新窗口打开查看图片点击可在新窗口打开查看
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发表于 2015-11-2 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
含量测定分析方法验证的可接受标准简介
在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005年颁布了分析方法验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
    1．准确度
    该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。
    可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。
    2．线性
    线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：
    在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
    可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。
    3．精密度
    1）重复性
    配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。
    2）中间精密度
    配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。
    4．专属性
    可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于980。
    5．检测限
    主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。
    6．定量限
    主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。
    7．耐用性
    分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。
    8、系统适应性
    配制6份相同浓度的供试品溶液进行分析，主峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%，主峰保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离，主峰的理论塔板数应符合质量标准的规定。
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iii_ii[使用道具]
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 小中大
学习一下
以来方法学验证要做这么多
以前只做系统适应性,线形,重现性,精密度,稳定性,加样回收
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