小中大溶剂都在过0.45um的滤膜后经过超声脱气了。在开机后也使用仪器自带的在线脱气排了气。
至于我说的怀疑是甲醇和盐溶液混合后产生气泡是因为，四元泵是低压混合泵。甲醇和缓冲盐溶液在混合的过程中可能会产生气泡。也有前辈建议我把盐溶液和甲醇混在一个溶剂瓶中，混合后脱气再进样。但是由于现在只是在摸实验的条件，具体缓冲盐的浓度和流动相的比例还在摸索过程中，所以现在没有把盐溶液和甲醇混在一起。
同时加甲醇和乙腈是参照文献的条件。文献的条件是用的乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液。
对于四楼的问题“为什么要同时用乙腈和甲醇？”，我也十分奇怪。参考了国内外的文献，很多流动相都是选用乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液。我自己在进行实验时时，发现方案1：乙腈：甲醇：磷酸二氢铵=50:35:15以及方案2：乙腈：甲醇：磷酸二氢铵=35:50:15，峰型和出峰的时间都差不多，我怀疑在缓冲盐比例和浓度一定的条件下乙腈和甲醇的比例好像不能影响我的峰形和出峰时间。乙腈和甲醇都是有机相，它们各自的洗脱能力我不是很清楚。有前辈说乙腈的洗脱能力要强于甲醇。我在想如果我的假设成立（在缓冲盐比例和浓度一定的条件下乙腈和甲醇的比例不影响我的峰形和出峰时间），我想在下次的摸索中直接选用乙腈和磷酸盐缓冲盐作为流动相。
我也不知道我的想法对不对，谢谢大家给我提的意见和建议。还请大家多多提意见。
谢谢大家的指导。
