小中大问题仍未解决,详细情况如下:
色谱条件:A相:0.1%TFA-水;
B相:0.1%TFA-甲醇;
流 速:0.8 ml/min;
压 力:160(新启用时)-180bar(使用一段时间后)左右(色谱柱带有在线过滤器);
样 品:多肽,面积归一化纯度≥98%;
一、现象
保证分离度≥1.5时以上柱子可正常使用的次数:约50个样品左右;
二、采取的办法
1. 新柱子加保护住,无效;情况和未加保护住仅使用在线过滤器的情况一致;
2. 将两相中TFA加量降至0.05%(pH=2.3),无效;
3. 向两相中添加0.1%三乙胺(pH=2.3),无效;