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标题:【求助】为什么只有丙酮酸和酮戊二酸的在C18上的峰...

wsll[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】为什么只有丙酮酸和酮戊二酸的在C18上的峰...

C18柱（柱子是新的耐酸柱子），30mM磷酸盐，pH=2.00。其他的有机酸比如：乳酸、苹果酸、丁二酸、柠檬酸等分离的都比较好，只有，丙酮酸和酮戊二酸的峰严重脱尾，峰形特宽。 这是为什么？是因为这两种物质都有酮基的缘故吗？是因为pH接近pKa吗？ 哪位老师能解释一下？ 谢谢！
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bhka[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能是流动相不适合这2个样品：）
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发表于 2015-11-24 22:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你知道这两种物质的PKa为多少吗？你的流动相PH有可能不符。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这可能是由于流动相的ph值不适当，适当调节磷酸量，另外拖尾的原因可能是由于那两个酸对柱子的吸附力太大了。
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cbou876[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教各位： C18的柱子，300A，可以用来测定18KD的蛋白质的纯度吗？会不会造成柱子堵塞？
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idea2011[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这两个化合物好象烯醇式的互变异构体都比较稳定。 会不会是因为互变异构的平衡影响了峰形？
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
经验交流： 我也正在摸索有机酸的测定方法，我用了11种小分子有机酸，发现除了苹果酸有两个峰（其中一个非常小，高度是第一个的约1/17，面积大概是1/10），酮戊二酸也有一个小小的峰，更小，其它物质分的特别好，我的条件是pH2.5，磷酸盐缓冲液为流动相，不知道你的条件，可以试试，希望帮我把多峰现象解决一下，谢谢！
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popo520[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我前阶段也在做有机酸的分析，除了发现苹果酸两个峰之外，其余十一二个酸出峰都很好，但是今天重新配标样时也发现了几个酸的拖尾现象，不知是否与标样浓度太高有关。另外，你的pH是否太低，可调至2.5左右看看。
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我 重新试过了，将其浓度降低就可以消除拖尾现象，你不妨一试
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了了[使用道具]
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发表于 2015-11-24 22:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

浓度降低消除脱尾现象，是因为柱子进样过载了
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