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请明确你的实验目的，是想进行基因克隆，还是检测表达，
如果是进行克隆，那么就应该是扩全长，若是检测就只要扩部分片段，
两者设计引物时，要求完全不同。
引物设计相关精华可参考：
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=708662&sty=1&tpg=1&age=-1')
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你的目的似乎是想扩出目的基因，所以应该是要扩全长。
步骤如下：
1。在genebank中搜到目的基因的全长mRNA序列；
2。确认目的片段的编码序列，也就是CDS；
3。根据CDS，在ATG及终止密码前后的序列来设计最佳引物；
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以TNF为例，谈谈如何搜到目的序列：
首先进入NCBI主页，然后在搜索框中输入“TNF”，数据库选“Gene”；
