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标题:【求助】ROX校正是怎么回事？

duchy[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】ROX校正是怎么回事？


一直都用Roche做实验，不知道还有ROX校正的说法，最近定购的TaqMan试剂盒中有ROX校正用的染料，还声明用于ABI和MX3000，请教一下，ROX校正是怎么回事，什么原理？不胜感激！
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yayya[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

ROX是ABI的专有染料！加在反应体系中之后用以平衡荧光强度的管间差。即在一批配制的反应液中的ROX浓度是一样的，这样，它们不同管之间的ROX荧光强度也应该是一样的。由于ABI的仪器检测荧光是用CCD模式，由于检测角度的不同，会形成荧光强度的管间差，这样，就会影响以荧光强度表示PCR产物多少的定量准确性！检测ROX的荧光强度，并根据ROX的荧光强度变化，去处这种管间差，可以使得FAM的检测更准确！
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发表于 2015-12-4 11:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这么说其实用别种染料应该也可以消除管间差，只要该仪器可以探测到此种染料并且对于待测荧光没有串扰？
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加入ROX进行校正,不仅是可以消除由于激发光强和检测光强引起的误差,而且可以消除加入MASTERMIX的误差. 一般ROCHE,ROTOR GENE的仪器不用ROX校正,因为他们的仪器不存在光强差.
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


ABI的仪器必须要用ROX纠正么？也就是说一定要选带ROX的试剂盒了？

[ 本帖最后由 summerxx 于 2015-12-4 11:19 编辑 ]
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发表于 2015-12-4 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
ABI的仪器必须要用ROX纠正么？也就是说一定要选带ROX的试剂盒了？
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MX3000 也需要ROX 校正
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duchy[使用道具]
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发表于 2015-12-4 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢大家的帮忙！
前几天在展会上问了ABI的技术支持，他的回答是为了消除管间差异。ABI的试剂盒中已含有ROX染料，这样就可以对一些诸如加样误差等因素进行校正。但如果使用Texas Red做荧光标记，就不能用ROX进行校正了，两种染料波长相近。
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发表于 2015-12-4 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是买了宝生物的试剂盒发现里面有两管ROX，才问这个问题的，我觉得这是个锦上添花的东西，没有应该也可以吧，我们这不是abi的机器，所以你最好还是问一下abi的销售才好。
Mx3000不是太清楚了，但他们的研发人员据说好多都是abi出来的，所以也用ROX校正就可以理解了。
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发表于 2015-12-4 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在很多公司都提供含有ROX跟不含有ROX的Mix， ABI 系列的机器是需要校正的， 就是需要含有ROX的Mix. 上海创英的定量PCR系类挺好的，可以咨询下。
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