小中大【求助】Real time PCR内参CT值奇高!
小弟刚入手荧光定量PCR,原理不是怎么清楚,糊里糊涂就做上去了.取的动物全血,200微升左右抽提,使用的是invitrogen的trzol.RNA抽提完没有DNA酶消化,直接RT,然后real time PCR检测基因表达的改变,RT 和real time PCR 的kit都是TAKARA,PCR结果让我更是糊里糊涂,内参的CT值(30~33)竟然比所有的基因ct值(28~32)都高,不知道什么原因,也不知道哪步出错了.荧光定量PCR完我把所有的孔拿回来跑普通的电泳,内参的条带比其它所有的基因都亮,怎么回事呢?请哪位高手指点一下,不知我有没有表达清楚?