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标题:【求助】磁珠分选

dreaming[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

切记不要用同一根柱子分选不同标记的细胞！
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49888[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

0.5%是指100ml里的浓度吗？2mM是什么意思啊？
0.5%是质量体积比，意思是100ml液体中加入0.5g BSA，2mM中mM一般是指mm/L是说每升中加入2mm(毫摩)。所以PH=7.2的PBS+0.5%的BSA+2mM的EDTA 配置是向1L pH 为7.2的PBS中加入5g(5g/L即每1000ml加入5gBSA，质量体积比为0.5/100)，加入2mmEDTA则是所需的Buffer
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tewank[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

学习了，过一段我也要用美天旎磁珠分选细胞
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那个buffer用胎牛血清代替BSA，需要多大浓度，还是0.5/%么？
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土坷垃[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
呵呵，我们用MS和LD柱都是重复利用过十几次的，跟新柱子做过比对，木有差别。每次分选完用buffer反复冲洗柱子几遍后用无水乙醇冲洗几遍，再放入有无水乙醇容器里完全浸泡（一定要无水，不然就会生锈），等做完实验再拿出来把柱中的无水乙醇打出，放置到一个小铁饭盒里拿去高压灭菌，在放到干燥箱里干燥就可以了，下次用的时候再拿到超净台里打开铁饭盒，用无菌镊子取出继续利用?

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一次需要分选两个人，能否用同一个柱子？就是说能否中间用Buffer反复吹打洗净柱子？
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土坷垃[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
200mlPBS+1gBSA+0.148gEDTA即可，不用调PH

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EDTA固体吗？这种Buffer配完是不是需要0.22um滤网过滤呢
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土坷垃[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那个buffer用胎牛血清代替BSA，需要多大浓度，还是0.5/%么？

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是的，按体积分数就行～
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土坷垃[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
0.5%是指100ml里的浓度吗？2mM是什么意思啊？
0.5%是质量体积比，意思是100ml液体中加入0.5g BSA，2mM中mM一般是指mm/L是说每升中加入2mm(毫摩)。所以PH=7.2的PBS+0.5%的BSA+2mM的EDTA 配置是向1L pH 为7.2的PBS中加入5g(5g/L即每1000ml加入5gBSA，质量体积比为0.5/100)，加入2mmEDTA则是所需的Buffer

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请问这buffer配一次能储存多久哈
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u76mp[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
EDTA固体吗？这种Buffer配完是不是需要0.22um滤网过滤呢

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是EDTA粉末，要过滤除菌的
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土坷垃[使用道具]
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发表于 2015-12-12 22:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 u76mp 于 2015-12-12 22:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
EDTA固体吗？这种Buffer配完是不是需要0.22um滤网过滤呢

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是EDTA粉末，要过滤除菌的

谢谢啦，
我刚买了碧云天的ETDA液体，打算用0.22μm滤器过滤之后分装保存在无菌离心管中
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