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标题:【求助】是什么问题导致样品上出现这种问题呢

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发表于 2015-12-15 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】是什么问题导致样品上出现这种问题呢

这是今天照的SEM，是纤维状的胶原，上面接种的有细胞，但是看的时候发现，上面不但找不到细胞，而且所有纤维上都有密密麻麻的小颗粒，这次同一批处理的都是这个样子，无论是多孔材料还是纤维都有这种小颗粒，以前的样品没有出过这种情况，都是很干净的。
这次处理标本步骤：戊二醛固定，PBS 冲洗，乙腈梯度脱水，低温冻干过夜，密封袋保存了三天（因为碰到周末），喷金，观察。
是什么问题导致样品上出现这种问题呢？这么小也不是灰尘啊？难道是冻干的问题吗？溶剂升华不彻底形成的？
还请高手帮忙！


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2015-12-15 14:54
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青青草[使用道具]
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发表于 2015-12-15 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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汗，没反应啊。。。。自己顶。。。。
顺便补充，今天的照片是场发射高分辨电镜，
不知道所谓的生物电镜是指什么？特殊的电镜吗？
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发表于 2015-12-15 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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我想它的英文名字就是environmental SEM（生物电镜）吧，这个可以测量活着的细胞。我也是准备做这个试验，能不能给点意见。我不太会准备测试的样品。
万分谢谢！
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发表于 2015-12-15 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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还有我觉得那个表面是不是盐的结晶物啊？你洗干净了吗？还有储藏是不是对样品不太好？
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小熊妮妮[使用道具]
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发表于 2015-12-15 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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就是没有洗干净，我也碰到过这个问题的
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发表于 2015-12-15 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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我的课题是做骨的，骨头已经用4%甲醛固定了，还能再做扫描电镜么？

谢谢！
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发表于 2015-12-15 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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理论上固定后做电镜是可以的，但是是否4%甲醛适合必须通过预试验确定。固定后的组织做电镜是可以的，多聚甲醛-戊二醛固定液不错。
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发表于 2015-12-15 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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首先，电镜要求取材后立即固定，这个太重要了。扫描电镜的标本要求组织块大小为1cm^3，也是为了在最短的时间内固定组织。建议你重新按要求取材固定后做扫描电镜检查，如果你用现在的标本做出是与不是之间的结果，没任何意义，花银子不说了，时间耽搁不起。
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发表于 2015-12-15 14:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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如果固定前洗好了，基本上没问题。扫描一般不会看很高倍的。
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malong[使用道具]
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发表于 2015-12-15 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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我觉得这倒是可以.扫描电镜是观察骨头表面.而且骨头本身就是固体.
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