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标题:【求助】描电镜和透射电镜 该怎么处理细菌

886爱[使用道具]
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【求助】描电镜和透射电镜 该怎么处理细菌

请教下各位老师 我的实验比较两种软膏对细菌的效果 做扫描电镜和透射电镜 有知道该怎么处理细菌的吗
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钻石[使用道具]
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【回复】

固定:2.5%戊二醛浸泡2小时,用0.1M pH7.2的磷酸缓冲液清洗3次;用1%锇酸固定2小时,磷酸缓冲液清洗3次。
脱水:乙醇梯度脱水,样品用30%,50%,70%,85%,95%逐级浸泡各5分钟,再用100%乙醇浸泡2次,每次5分钟。
冷冻干燥和喷金:这个我是让电镜室的工作人员干的~~~

透射也做过一次,好像差不多,具体忘记了......毕业论文上没写~~~
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QQ爱[使用道具]
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【回复】

谢谢,不过我的问题是固定之前怎么处理细菌与药物的?
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malong[使用道具]
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【回复】

透射电镜要制成悬液,然后离心成团固定,这个需要10六次方以上的菌量,如果细菌量少,可以用琼脂预包埋一次,增大体积后再用戊二醛固定。

扫描的程序忘记了,好像是悬液滴到玻片上再固定,最后吧玻片粘到样品托上观察,10多年了,不知道还是不是这个流程。
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