扫描电镜之家

请问细胞材料的电镜如何做阿？谁有这方面的资料？急用，谢谢了！！

我们这有电镜室,我看他们是将我的细胞(悬浮细胞,离心后交给电镜室)用一种树脂之类的包埋剂包埋后,进行超薄切片,然后其他过程就不知道了.如果是贴壁细胞,先消化下来,洗涤离心后一样处理.

们这有电镜室,我看他们是将我的细胞(悬浮细胞,离心后交给电镜室)用一种树脂之类的包埋剂包埋后,进行超薄切片,然后其他过程就不知道了.如果是贴壁细胞,先消化下来,洗涤离心后一样处理.

离心了不就看不出细胞间是如何作用的了吗？

在透射电镜下观察到的细胞之间有一定的空隙，这个取决于前期收样时的离心速度，一般为2000rpm，10min。

细胞间作用可以用扫描电镜做。
贴壁细胞在培养时在底部加一个盖波片使细胞帖服其上，长好后漂洗固定……做扫描电镜即可

悬浮细胞，要轻微离心洗涤，然后在小小的托盘中使沉淀，做扫描。比较麻烦。

第一：你要观察什么？
如果要观察细胞的表面结构，做扫描电镜；要观察细胞器等内部结构，则要做透射电镜。
第二：细胞如何准备？
悬浮细胞－扫描电镜制样：将盖玻片洗干净后用多聚赖氨酸包被晾干，将细胞用2.5％戊二醛固定后滴在玻片上，再进行以下的后固定及脱水等步骤。
贴壁细胞－扫描电镜制样：细胞爬片后2.5％戊二醛固定，再进行以下的后固定及脱水等步骤。
透射电镜制样：细胞收集在离心管内，PBS冲洗后2.5％戊二醛固定，再进行以下的后固定及脱水等步骤。注意透射电镜要求的细胞数量较多，大约要米粒大小的细胞团。

不知你要做的是悬浮细胞还是贴壁细胞，对于悬浮细胞做扫描电镜，直接收集细胞，清洗，用2.5％的戊二醛、1％的锇酸双固定，梯度酒精脱水，乙酸异戊酯置换后，将细胞悬液点在用多聚赖氨酸包被的盖玻片上，CO2临界点干燥，镀膜，观察。而做透射电镜时，收集细胞后，直接将细胞悬液加入做好的琼脂管中（eppendorf管中加入2％的琼脂，中间用牙签弄个小洞），离心后，切开eppendorf管，切去多余的琼脂，留下包埋细胞的琼脂块，用2.5％的戊二醛、1％的锇酸双固定，梯度酒精脱水、渗透、包埋、聚合、超薄切片，染色，观察。
对于贴壁细胞，在做扫描电镜时，最好把细胞接种在盖玻片上，当细胞长满盖片时，清洗，直接将长满细胞的盖玻片用2.5％的戊二醛、1％的锇酸双固定，脱水，乙酸异戊酯置换，CO2临界点干燥，镀膜，观察。而在做透射电镜时，只好先消化收集细胞，其余步骤同悬浮细胞。