小中大LZ,你好!
我做的小鼠腹膜的MicroRNA实验。为什么我提取的组织RNA的RT-PCR数据分析时CT值误差很大,而且Tm值那一栏没有数值,一个都没有。9个样本,做出来却只有3根溶解曲线。会不会是没有提取到RNA?怎么验证?
请帮忙解答,谢谢!
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您好,关于这个问题,可能需要您多个方面去验证:1、RNA的OD值怎样?反转录时您可以把体系里的水都弄成RNA,也许会好些;2、内参基因CT值多少?每个样本的内参CT如果都靠后或者没有的话应该是RNA不够;3、如果内参CT好的话,把你定量完的PCR产物跑3%的凝胶电泳看下有没有条带,如果没有,看看是否目的基因的引物有问题?