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标题:【求助】高分辨率单分子拉曼成像

今生如此[使用道具]
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【回复】

Raman测定的是散射光,得到的是Raman shift. Raman shift和绝对波长(荧光光谱)之间要一个转换的吧。
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xgy412[使用道具]
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【回复】

. 生物样品一般荧光峰比较宽,用荧光光测试之前一般先会做仪器本身曲线校正也就是仪器本身的响应曲线,这样测出的荧光峰才比较准,特别是对于宽峰更要做这个较准。
而Raman光谱一般采集的区域比较窄(指的是波长区域),一般在窄的波长范围变化不大,因此一般不考虑仪器本身响应曲线误差,但是Raman光谱来测宽荧光峰,影响就比较大。
四、什么是共焦显微拉曼光谱仪?
1. 共焦拉曼指的是空间滤波的能力和控制被分析样品的体积的能力。通常主要是利用显微镜系统来实现的。
仅仅是增加一个显微镜到拉曼光谱仪上不会起到控制被测样品体积的作用的—为达到这个目的需要一个空间滤波器。
2.(1)、显微是利用了显微镜,可以观测并测量微量样品,最小1微米左右
(2)、共焦是样品在显微镜的焦平面上,而样品的光谱信息被聚焦到CCD上,都是焦点,所以叫共聚焦
3. 拉曼仪器的共焦有2种呢,一种是针孔共焦,一种是赝共焦.我觉得好像不应该称为赝共焦,共聚焦有真正的定义说一定要针孔才是共聚焦吗?好像没有,顶多称为传统共聚焦或者针孔共聚焦、简单共聚焦之类的。
个人想法,大家指正。
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malong[使用道具]
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【回复】

请问,测固体粉末的拉曼图谱时,对于荧光很强的物质,应该如何处理?特别是当荧光将拉曼峰湮灭时,应该怎么办?增加照射时间的方法,我试过,连续照射了4小时,结果还是有很强的荧光。我只有一台532nm的激光器,所以更换激光波长的方法目前我不能用。想问问各位,还有别的方法吗?
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哈密瓜[使用道具]
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【回复】

使用SERS技术或者使用很少量的样品进行测量,或者稀释你的样品到一些别的基体里面去,比如说KBr。
2. 波长不可调的话,激光强度应该是可调的,你把激光强度调低点试试。这个在光源和软件上都有调的。全调到比较低的,然后再用长时间试试。
3. 可以尝试找一种溶剂溶解粉末,看能不能猝灭荧光背景。采用反斯托克斯,滤光片用Nortch滤光片。
六、请问用激光拉曼仪能测量薄膜的厚度、折射率及应力吗?它能对薄膜进行那些方面的测量呢?
1. 应该不能测薄膜的厚度、折射率及应力吧
2. 现在的共焦显微拉曼可以做膜及不同层膜的,你的问题我觉得用椭偏仪更好
3. 拉曼光谱可以测量应力,厚度好像不行
4. 应力可以测,应力有差别的时候拉曼会有微小频移,其他两种没听说过拉曼能测
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886爱[使用道具]
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【回复】

不错的资料,很好,可以再讲讲Raman测试的原理,锐利散射等问题。从理论上先探讨一下:
拉曼效应:
1,当一束激发光的光子与作为散射中心的分子发生相互作用时,大部分光子仅是改变了方向,发生散射,而光的频率仍与激发光源一致,这种散射称为瑞利散射。但也存在很微量的光子不仅改变了光的传播方向,而且也改变了光波的频率,这种散射称为拉曼散射。拉曼散射的产生原因是光子与分子之间发生了能量交换,改变了光子的能量。
2,Raman 光谱的参数:
1. 峰位: 是电子能级基态的振动态性质的一种反映。以入射光和散射光波数差表示。峰位的移动与激发光的频率无关。
2.强度:与浓度成正比。
3.退偏比(depolarization ratio):
   r = I‖ / I提供分子对称性的信息,并有助于谱线的指认。
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wawa11[使用道具]
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【回复】

做了细胞拉曼光谱,现在需要分析数据,请问怎样扣除背景光以及噪声?Sample TextSample Text
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886爱[使用道具]
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【回复】

楼主,问一下,我用labspec软件,测到细菌样品a,b,a+b,三种谱图,a和b谱图相差不是很大,像软件自带的modeling 功能采用的是Direct Classical Least Squares方法,这个方法能都用来判断混合物中的两种单组份的含量吗
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xiaoxiaoai[使用道具]
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【回复】

染料与金之间有三十个碱基,约有10nm吧?如果用13nm金是不是就没什么效果了,56nm的貌似也增强不明显呢,请教大虾们~~
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PP熊[使用道具]
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【回复】

我做的两种材料 一种表面会有很少量的量子点 但是测Raman的时候 只有一种材料的峰 没有量子点的对应的峰,但是峰强有很大的提升,请高人予以解答 谢谢
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mimima[使用道具]
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【回复】

请问大家,
预共振拉曼散射pre-resonance Raman scattering
离散共振拉曼discrete resonance Raman
连续拉曼散射continuum Raman scattering
这三种拉曼的概念 以及区别吗?
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