PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » [精华]酶切问题讨论专栏

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 98  8/10 ‹‹12345678910››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[精华]酶切问题讨论专栏

森林木[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 71292
精华 0
积分 153
帖子 86
信誉分 100
可用分 1116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-24
状态 离线
71

发表于 2011-10-7 17:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我已经试了DH5a与JM109，BL21都不行。
顶部
HP007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74166
精华 0
积分 446
帖子 612
信誉分 100
可用分 3833
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
72

发表于 2011-10-7 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求助：
单酶切产物比未酶切产物跑的快，这种现象应该怎么解释？是酶切没切动，还是其他原因？
顶部
3N4G[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74178
精华 0
积分 408
帖子 536
信誉分 100
可用分 3461
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
73

发表于 2011-10-7 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
单酶切产物如果是一条带，那么就是质粒ＤＮＡ的分子量，未酶切的产物不好定性！
顶部
生物迷[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73538
精华 2
积分 930
帖子 1192
信誉分 104
可用分 6986
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
74

发表于 2011-10-7 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
线状DNA是要比环状DNA跑的快些。环状DNA在胶里可能阻力大些，而且还有不同螺旋。  
顶部
#甜#[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72838
精华 0
积分 300
帖子 319
信誉分 100
可用分 2361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
75

发表于 2011-10-7 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大家有没有人用过大连宝生物的内切酶，感觉如何呢？
我用了这个公司的内切酶后就是连不上！
顶部
麻瓜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70075
精华 0
积分 205
帖子 149
信誉分 100
可用分 1516
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-4
状态 离线
76

发表于 2011-10-7 17:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
版主好厉害！

小弟偶在做PCR产物 NSP I（NEB）单酶切，不知版主有没有用过这个酶？它的最佳反应温度是37度，我一直用2h，但还没见到有切出特别好的，不知时间是不是要延长？
顶部
3N4G[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74178
精华 0
积分 408
帖子 536
信誉分 100
可用分 3461
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
77

发表于 2011-10-7 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以延长酶切时间,过夜!
顶部
麻瓜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70075
精华 0
积分 205
帖子 149
信誉分 100
可用分 1516
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-4
状态 离线
78

发表于 2011-10-7 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
酶切时间过长对产物片断会有另外影响吗？
顶部
@木木@[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70086
精华 0
积分 222
帖子 183
信誉分 100
可用分 1673
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-4
状态 离线
79

发表于 2011-10-7 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
载体的量很关键，使用尽量多的载体。
顶部
麻瓜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70075
精华 0
积分 205
帖子 149
信誉分 100
可用分 1516
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-4
状态 离线
80

发表于 2011-10-7 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知哪位大虾有没有试过在PCR反应液里边直接加内切酶消化呢？
按照NEB说明书“内切酶在PCR反应产物中的活性”是可以的说。
顶部
 98  8/10 ‹‹12345678910››