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标题:[求助]全血中DNA的快速提取方法

喵咪[使用道具]
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1、抗凝剂可用ACD
2、快速的粗提取:
1)200ul的全血加入1000ml的蒸馏水中
2)5000转离心2min,重复用蒸馏水洗涤至基本无红色即无红细胞
3)用TE200ul溶解沉淀
4)加1 .5mol/L 150ul
5)加2倍的无水乙醇沉淀
6)凉干,加蒸馏水100ul即可
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头发很短[使用道具]
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你可以用上海生工的全血基因组DNA抽提试剂盒,,抽提一次最多四十分钟,价格也不高,用200-500ul全血即可。但需要用ACD抗凝,配方应该是柠檬酸0.48g+柠檬酸三钠1.32g+葡萄糖1.47g,再加三蒸水至100ml配成的。每6ml 全血加1ml ACD抗凝。但是一定要注意在抽提过程中,用TE悬浮的要充分,保温时间适当延长至十分钟,效果还是比较好的,而且也不会影响PCR反应。
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tieshazhang[使用道具]
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请问配制ACD一定要用三蒸水吗?
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何去何从[使用道具]
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从没有添加抗凝剂的牛血能否提出DNA?
我觉得很难,因为血液凝固后白细胞都集中在凝血块中了,而凝血块本身又很难破碎。
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Biotekepeter[使用道具]
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还在手动提取核酸呀,何不采用核酸自动提取仪呢!

BioTeke 的核酸提取仪,现在您只要有100多个样本,我们就可以给您免费申请使用我们的核酸提取仪,我们只收取试剂的成本费用,仪器免费使用!提取完毕后,仪器归还我们公司即可!每天轻松提取400个样本,其他时间还可以做你想做的事情!提取核酸就是这么简单!了解更多加工程师Q2404988600   

以下产品是我们的升级配方,与核酸提取仪配套使用效果更好:

全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
         产品编号 包装  价格
DP1101 50次  询价
  DP1102   100次 询价

        
试剂盒组成、储存、稳定性:
       试剂盒组成         保存          50次            100次
                                        (DP1101)     (DP1102)
       红细胞裂解液      室温         50 ml            100 ml
       细胞核裂解液      室温         17 ml              33 ml
       蛋白沉淀液         室温           6 ml              11 ml
       DNA溶解液        室温          10 ml              20 ml
本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。

产品说明:
本试剂盒根据全血特点采用几个简单步骤快速提取基因组DNA。首先红细胞裂解液裂解去除不含DNA的红细胞,细胞核裂解液裂解白细胞释放出基因组DNA, 然后蛋白沉淀液沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒特点:
◆   从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全。
◆   不需要蛋白酶K,不需要酚/氯仿抽提。
◆   快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
◆   结果稳定,产量高(典型的产量300μl 全血可提取出5-15μg),DNA纯度达1.7~2.0(OD260/OD280),长度可达50Kb-200kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
◆   百泰克说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红细胞裂解不完全、DNA产量低、DNA长度小于30kb、未见到蛋白沉淀、A260/A280 <1.6、DNA沉淀难以重新溶解水化、下游酶切切不开等)。


请查看公司产品被引用文章:
cuturl('http://www.bioteke.com/chn/citation.asp')
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