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标题:【求助】琼脂糖凝胶电泳图

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发表于 2015-12-31 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】琼脂糖凝胶电泳图


各位大侠：这是我做的植物DNA的琼脂糖凝胶电泳图，是总DNA，最后一个跑的比较好，但是其它的没分开脱尾很严重，请问各位大侠会是什么原因？急需解决。


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2015-12-31 11:28
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seagate[使用道具]
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发表于 2015-12-31 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
减少些上样再看看，降解肯定有的了。
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33号[使用道具]
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发表于 2015-12-31 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢！现在提的好多了，不再脱尾了。
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发表于 2015-12-31 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉不像降解，拖带了吧！
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发表于 2015-12-31 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1、减少上样量
2、不像降解，感觉纯度不好，蛋白残留，做一下酚氯仿纯化吧
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发表于 2015-12-31 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

拖尾很重的话是不是电压太高了？
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发表于 2015-12-31 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

话说哪个是marker我没看出来……（被扔出去）
我们学校生物课做的时候也有一个组拖尾很厉害，但其他组都还可以
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发表于 2015-12-31 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
非常感谢各位高手的帮助！我的提取过程是第一次用氯仿-异戊醇，没加酚，第二次是用氯仿。是不是这也有影响呢？另外也没加RNA酶。谢谢！后来跑的电泳图如下：


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2015-12-31 15:08
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loli[使用道具]
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发表于 2015-12-31 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般PCR中引物的终浓度为0.2～10µmol/L。引物浓度过高可能导致非特异产物合成，还会增加引物二聚体的形成；但引物终浓度低于0.2µmo1/L时产量降低。亮带是二聚体，我的研究中单条引物的终浓度采用的是0.4µmol/L，获得了较好的效果。
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loli[使用道具]
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发表于 2015-12-31 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得还一种情况就是纯化的问题
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